MINISTERIO DE RELACIONES EXTERIORES Y CULTO
MERCOSUR/GMC/RES. Nº 11/15
FARMACOPEA MERCOSUR: ESPECTROFOTOMETRÍA INFRARROJO
VISTO: El Tratado de Asunción, el Protocolo de Ouro Preto y las Resoluciones N° 31/11 y 22/14 del Grupo Mercado Común.
CONSIDERANDO:
Que la Farmacopea MERCOSUR tiene como objetivo establecer los
requisitos mínimos de calidad y seguridad de los insumos para la salud,
especialmente de los medicamentos, apoyando las acciones de
reglamentación sanitaria y promoviendo el desarrollo técnico,
científico y tecnológico regional.
Que las especificaciones farmacopeicas establecen, por medio de
monografías, requisitos mínimos para el control de seguridad y calidad
de los insumos, especialidades farmacéuticas, plantas medicinales y
derivados producidos o utilizados en los Estados Partes.
Que las especificaciones farmacopeicas son utilizadas como parámetro
para las acciones de vigilancia sanitaria, incluyendo el registro de
medicamentos, inspecciones y análisis de laboratorio.
Que la Farmacopea MERCOSUR y la producción de patrones propios de
calidad favorecen al desarrollo científico y tecnológico de los Estados
Partes, contribuyendo a la disminución de la dependencia de proveedores
extranjeros y promoviendo a la industria regional.
Que la Farmacopea MERCOSUR debe ser primordialmente sanitaria, con
énfasis en la salud pública, y presentar una metodología analítica
accesible a los Estados Partes, buscando su reconocimiento y
respetabilidad internacional.
Que el diálogo regulatorio y la integración entre los Estados Partes
promueven el acceso de la población a medicamentos con mayor calidad y
seguridad.
Que el Acuerdo Nº 08/11 de la Reunión de Ministros de Salud del
MERCOSUR constituye un marco de referencia para la Farmacopea MERCOSUR.
EL GRUPO MERCADO COMÚN
RESUELVE:
Art. 1 - Aprobar, en el marco de lo establecido en la Resolución GMC N°
22/14, el método general “Farmacopea MERCOSUR: Espectrofotometría
infrarrojo”, que consta como Anexo y forma parte de la presente
Resolución.
Art. 2 - Los Estados Partes indicarán en el ámbito del SGT N° 11 los
organismos nacionales competentes para la implementación de la presente
Resolución.
Art. 3 - Esta Resolución deberá ser incorporada al ordenamiento jurídico de los Estados Partes antes del 1/XII/2015.
XCVIII GMC - Brasilia, 29/V/15
ANEXO
ESPECTROFOTOMETRÍA INFRARROJO
Introducción
La radiación electromagnética es una forma de energía que se propaga
como ondas y puede ser subdividida en regiones de longitudes de onda
características. Asimismo, puede ser considerada también como un flujo
de partículas denominadas fotones (quanto). Cada fotón contiene
determinada energía cuya magnitud es proporcional a la frecuencia e
inversamente proporcional a la longitud de onda. La longitud de onda
(?) es generalmente especificada en nanómetros, nm (10-9 metros) y en
algunos casos en micrómetros, µm (10-6 metros). En caso del infrarrojo
la radiación electromagnética puede ser también descrita en términos de
número de onda y expresada en cm-1. Los rangos de longitud de onda de
energía electromagnética de interés para el infrarrojo se describen en
Tabla 1.
La espectrofotometría infrarroja es un método de medida de la absorción
de la radiación en un rango de longitudes de onda, cuando ésta pasa a
través de una capa delgada de sustancia.
La espectrofotometría de infrarrojo es un ensayo de identificación por
excelencia siendo capaz de distinguir sustancias con diferencias
estructurales. De las tres regiones de infrarrojo (cercano, medio y
lejano), la región comprendida entre 4000 a 400 cm-1 es la más empleada
para fines de identificación. Sin embargo, en algunos casos es
utilizado con fines cuantitativos. El espectro de infrarrojo (IR) es
único para cualquier compuesto químico con excepción de los isómeros
ópticos que tienen espectros idénticos. En algunas ocasiones, el
polimorfismo puede ser responsable de diferencias en el espectro IR de
un compuesto en estado sólido.
Debido al gran número de valores máximos en un espectro de absorción
IR, a veces es posible medir cuantitativamente los componentes
individuales de una mezcla con una composición cualitativa conocida sin
separación previa.
Cuando los ensayos por absorción infrarroja se aplican sobre una
muestra resultante de la extracción a partir de una formulación, puede
que no sea siempre posible una estricta concordancia con el espectro de
referencia. Sin embargo, el espectro del material extraído y el
espectro de referencia deberían alcanzar una similitud cercana. El
índice de concordancia deberá ser establecido en cada caso particular,
con su correspondiente verificación.
Equipo
Los espectrofotómetros utilizados para la obtención del infrarrojo
medio y cercano consisten de una fuente de luz, monocromador o
interferómetro y detector, los cuales permiten la obtención de
espectros en la región comprendida entre 780 nm a 25000 nm (12800 cm-1
a 400 cm-1). Actualmente, los espectrofotómetros de infrarrojo utilizan
un interferómetro en lugar de un monocromador en cuyo caso la radiación
policromática incide sobre la muestra y los espectros son obtenidos en
el dominio de la frecuencia con ayuda de la transformada de Fourier.
Verificación de desempeño del equipo
Escala de número de onda
La escala de número de onda puede ser verificada registrando el
espectro de un film de poliestireno que presente máximos de absorción a
los números de onda que se detallan a continuación:
Resolución
1- Para instrumentos que utilicen monocromador registrar el espectro de un film de poliestireno certificado de 35 µm de espesor.
2- Para instrumentos con Transformada de Fourier seleccionar una
resolución adecuada con una apodisación apropiada según indicación del
fabricante. Registrar el espectro de un film de poliestireno
certificado de 35 µm de espesor.
Especificaciones
Instrumentos con monocromador:
- La diferencia entre el porcentaje de transmitancia en el máximo de
transmisión a 2870 cm-1 (3,48 µm) y en el mínimo de transmisión a
2849,5 cm-1 (3,51 µm) debe ser mayor a 18.
- La diferencia entre el porcentaje de transmitancia en el máximo de
transmisión a 1589 cm-1 (6,29 µm) y en el mínimo de transmisión a 1583
cm-1 (6,32 µm) debe ser mayor a 10.
Instrumentos con transformada de Fourier:
- La diferencia entre las absorbancias en el mínimo de absorción a 2870
cm-1 y en el máximo de absorción a 2849,5 cm-1 debe ser mayor a 0,33.
- La diferencia entre las absorbancias en el mínimo de absorción a 1589
cm-1 y en el máximo de absorción a 1583 cm-1 debe ser mayor a 0,08.
Preparación de muestras y modos de medición
a) Método por medida de transmitancia o absorbancia
Se debe utilizar la muestra secada bajo las condiciones descritas en el
ensayo Perdida por secado, a no ser que se especifique de otra forma en
la monografía.
Se debe preparar la muestra de acuerdo a uno de los siguientes
procedimientos, según se indica en la monografía individual, de modo
que la transmitancia de la mayoría de las bandas se encuentre en el
rango de 5 a 80%.
- Método de disco de bromuro de potasio o cloruro de potasio (método en fase sólida)
Pulverizar 1 - 2 mg de la muestra sólida en un mortero de ágata,
triturar con 0,30 a 0,40 g de bromuro de potasio o cloruro de potasio
para espectrofotometría de infrarrojo, tomando precauciones respecto a
la absorción de humedad y comprimir la mezcla en un molde adecuado con
forma de disco. Si la sustancia a analizar es un clorhidrato, es
recomendable utilizar cloruro de potasio. Aplicar una presión de 50 a
100 kN por cm2 durante por lo menos 1 minuto, con ayuda de vacío en
caso de ser necesario, a fin de obtener un disco transparente de
aproximadamente 13 mm de diámetro.
El disco debe desecharse si no está uniformemente transparente cuando
se lo examina visualmente o si la transmitancia a 2.000 cm-1 (5 µm), en
ausencia de una banda de absorción específica, es menor de 75% sin
emplear compensación en el haz de referencia.
La humedad presente en la sustancia a analizar y/ o en la matriz
provocará apariencias irregulares en los discos de haluros de potasio,
tales como manchas y/ u opacidades.
Asimismo, y junto a la humedad aportada por el sistema analítico, ésta
contribuirá a la aparición de bandas en la región del IR cercano.
Por ello, es conveniente secar la sustancia a analizar bajo las
condiciones descriptas en el ensayo Pérdida por secado, a no ser que se
especifique de otra forma en la monografía.
Método para películas
Analizar una película delgada tal cual es o preparada como se describe en la monografía individual.
Método en solución para sólidos
Preparar la solución por el método indicado en la monografía
individual, en una celda para líquidos de material transparente a la
radiación infrarroja, y realizar la medida del espectro contra el
solvente de referencia utilizado para preparar la solución de la
sustancia a analizar. Normalmente, se obtienen resultados óptimos al
utilizar concentraciones en el rango de 10-100 g/L para caminos ópticos
de 0,1 mm a 0,5 mm. El solvente utilizado en este método no debería
exhibir interacciones o reacciones químicas con la sustancia a analizar
así como tampoco dañar la celda. Aquellas regiones del espectro en las
que el solvente presenta una fuerte absorción no deben tenerse en
cuenta.
Los solventes orgánicos a utilizar deben estar exentos de agua.
Método en suspensión para sólidos
Triturar 5 a 10 mg de la sustancia sólida a analizar con 2 gotas de
vaselina líquida u otro líquido apropiado hasta obtener una mezcla
cremosa homogénea. Colocar una porción de la mezcla así obtenida entre
dos placas de cloruro de sodio, bromuro de potasio u otro material
transparente a la radiación infrarroja y presionar suavemente las
placas para formar una película fina.
Método en película fina para líquidos
Colocar 1 o 2 gotas de la sustancia líquida a analizar entre dos placas
de cloruro de sodio, bromuro de potasio u otro material transparente a
la radiación infrarroja y presionar suavemente las placas para formar
una película fina.
Método en celda para líquidos
Puede emplearse una celda del mismo material descrito en Método en película fina para líquidos y de paso óptico apropiado.
Método para gases
Introducir la sustancia gaseosa a analizar en una celda para gases,
previamente evacuada y llenando a la presión que se especifica en la
monografía; analizar su espectro de absorción. La longitud del camino
óptico de la celda es usualmente 10 cm, pero si es necesario podría
exceder 1 m.
Para evitar interferencias de absorción debido al vapor de agua,
dióxido de carbono u otros gases atmosféricos, colocar en el haz de
referencia una celda idéntica evacuada o llenada con un gas
transparente a la radiación infrarroja, por ej. nitrógeno o argón. Si
es necesario, ajustar la presión en la celda a la presión atmosférica
usando un gas transparente a la radiación infrarroja (nitrógeno, o
argón).
b) Método de reflectancia difusa (DRIFT)
Método para sólidos
Preparar una mezcla compuesta por la sustancia a analizar y bromuro de
potasio o cloruro de potasio finamente pulverizados y secados, con una
concentración aproximada al 5%, a menos que se especifique de otro modo
en la monografía individual. Triturar en mortero de ágata con la
precaución de evitar la absorción de humedad, colocar la mezcla en el
accesorio correspondiente para sólidos, y registrar el espectro de
reflectancia.
Se recomienda que tanto la muestra como la matriz tengan un tamaño de partícula menor a 50 µm.
El espectro de reflectancia es tratado con el algoritmo de Kubelka -
Munk a fin de obtener el espectro en unidades de absorbancia.
c) Método reflectancia total atenuada (ATR)
Método para líquidos, geles, polvos, pastas, sólidos, películas y recubrimientos
Colocar la sustancia a ser analizada en estrecho contacto con un
elemento de reflectancia interna como diamante, germanio, seleniuro de
cinc, bromuro de talio- ioduro de talio (KRS-5) u otro material
apropiado de alto índice de refracción. Asegurar que el contacto entre
la sustancia a analizar y la totalidad de la superficie del elemento de
reflectancia interna sea uniforme, aplicando presión o disolviendo la
sustancia en un solvente apropiado mediante distribución sobre la
superficie del cristal y posterior evaporación hasta sequedad. Examinar
el espectro de ATR.
Criterios de identificación
Una sustancia puede ser identificada cuando presente únicamente máximos
de absorción en los mismos números de onda y con intensidades relativas
similares al espectro de una sustancia de referencia o al espectro de
referencia de la sustancia. Además cuando en la monografía son
especificadas absorciones a varios números de onda, la identificación
de la sustancia comparada con la sustancia esperada puede ser
confirmada por la presencia de las bandas de absorción a los números de
onda especificados.
A menos que se especifique de otra forma en la monografía individual,
se debe proceder mediante Identificación por uso de sustancia de
referencia.
1. Identificación por sustancia de referencia
Los máximos de absorción en el espectro obtenido con la muestra deben
corresponder en posición e intensidad relativa a los obtenidos
concomitantemente con la sustancia de referencia. En el caso de no
haber concordancia en los espectros de la muestra sólida y de la
sustancia de referencia, disolver porciones iguales de la muestra y de
la sustancia de referencia en volúmenes iguales de un solvente
apropiado, evaporar las soluciones hasta sequedad bajo condiciones
idénticas y repetir el ensayo con los residuos.
2. Identificación por espectro de referencia Farmacopea MERCOSUR
Preparar la muestra en condiciones similares a las indicadas para la
obtención del espectro de referencia y registrar el espectro de la
sustancia a analizar. Los máximos de absorción en el espectro obtenido
con la muestra deben corresponder en posición e intensidad relativa a
los exhibidos en el espectro de referencia.
En el caso de no haber concordancia entre el espectro obtenido con la
muestra sólida y el espectro de referencia, disolver la muestra en un
solvente apropiado, evaporar la solución hasta sequedad y repetir el
ensayo con el residuo.
Comparar los espectros y los máximos del poliestireno indicados en
Verificación de desempeño del equipo.
3. Identificación por máximos de absorción
Los máximos de absorción en el espectro obtenido con la muestra deben
corresponder en posición a todos los indicados en la monografía
individual.