En este capítulo se describen los ensayos que deben cumplir los envases plásticos de uso farmacéutico, incluyendo los envases destinados a sangre y hemoderivados, así como también las materias primas con las cuales se fabrican.

Los polímeros generalmente empleados para la fabricación de envases son el polietileno (de baja y alta densidad), el polipropileno, el poli(cloruro de vinilo), el terftalato de polietileno y copolímeros de etileno y acetato de vinilo.

La naturaleza y la cantidad de los aditivos está determinada por el tipo de polímero, el proceso empleado para la construcción del envase y el uso para el cual el mismo está destinado. Los aditivos pueden ser antioxidantes, estabilizantes, plastificantes, lubricantes, colorantes, modificadores de impacto, etc. Los agentes antiestáticos y desmoldantes pueden emplearse únicamente en aquellos envases que serán destinados a preparaciones de uso oral o externo. Para cada tipo de material descripto en este capítulo se indican los aditivos aceptados.

El envase plástico elegido para cualquier preparación debe ser tal que, los componentes del producto, que están en contacto con el material plástico no sean significativamente adsorbidos sobre su superficie y no se produzcan migraciones desde las paredes del envase. De la misma manera, el material del envase no debe ceder cantidades apreciables de ninguna sustancia que pueda afectar la estabilidad de la preparación o presentar un riesgo de toxicidad. A fin de confirmar la compatibilidad del envase con el contenido y para asegurar que no se produzcan cambios perjudiciales en cuanto a la calidad de la preparación, se describen diversos ensayos tales como la comprobación de la ausencia de cambios en las características físicas; la evaluación de cualquier pérdida o ganancia de materia debido a la permeabilidad del envase; la detección de cambios de pH; la evaluación de cambios ocasionados por la luz; ensayos químicos y, si así se requiere, ensayos biológicos.

Los materiales que se describen a continuación se emplean para la fabricación de envases para uso farmacéutico.

Los materiales a base de poli(cloruro de vinilo) plastificado contienen diversos aditivos, además del polímero de alto peso molecular obtenido por polimerización de cloruro de vinilo.

Los materiales a base de poli(cloruro de vinilo) plastificado para envases destinados a contener sangre humana y hemoderivados y envases para soluciones acuosas para perfusión intravenosa se definen por la naturaleza y las proporciones de las sustancias empleadas en su fabricación.

Contienen no menos de 55 % de poli(cloruro de vinilo) y pueden contener los siguientes aditivos:

LIMITES DE ADITIVOS

Ningún aditivo antioxidante debe agregarse al polímero. Cuando se agregan colorantes, sólo se puede agregar azul ultramarino. No se debe agregar ningún colorante al poli(cloruro de vinilo) destinado a la fabricación de envases para sangre y hemoderivados.

CARACTERISTICAS

Polvo, perlas, gránulos o láminas translúcidas de espesor variable, incoloras o de color amarillo pálido.

IDENTIFICACION - [NOTA: si es necesario, cortar el material a ensayar en trozos de tamaño apropiado.]

A 2,0 g del material a ensayar agregar 200 ml de éter libre de peróxidos y calentar a reflujo durante 8 horas. Separar el residuo (B) y la solución (Solución A) por filtración.

Evaporar la Solución A a sequedad bajo presión reducida en un baño de agua a 30 °C. Disolver el residuo en 10 ml de tolueno (Solución A₁). Disolver el residuo B en 60 ml de dicloruro de etileno, calentando en un baño de agua a reflujo y filtrar. Agregar la solución gota a gota y con agitación enérgica a 600 ml de heptano calentando a una temperatura menor a la temperatura de ebullición. Filtrar la mezcla en caliente a través de un filtro caliente para separar el material insolubilizado (B₁) de la solución orgánica. Dejar enfriar, separar el precipitado (B₂) formado y filtrar a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media, previamente pesado.

A - Absorción infrarroja <460>. Disolver el material insolubilizado B₁ en 30 ml de tetrahidrofurano y agregar, en pequeñas porciones con agitación, 40 ml de etanol. Separar el precipitado (B₃) por filtración y secar al vacío a una temperatura no mayor de 50 °C sobre pentóxido de fósforo o cloruro de calcio anhidro. Disolver unos pocos mg del precipitado B₃ en 1 ml de tetrahidrofurano. Colocar algunas gotas de la solución obtenida sobre una placa de cloruro de sodio y evaporar a sequedad entre 100 y 105 °C. Registrar el espectro de absorción infrarroja y comparar con el espectro obtenido con poli(cloruro de vinilo) SR-FA.

B - Aplicar la siguiente técnica cromatográfica.

Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil - Tolueno.

Solución estándar - Disolver 0,8 g de ftalato de bis(2-etilhexilo) SR-FA en tolueno y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución muestra - Solución A₁.

Procedimiento - Aplicar por separado sobre la placa 5 µl de cada solución. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartos de la longitud de la placa. Retirar la placa de la cámara, marcar el frente del solvente y dejarla secar. Examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm. El valor de R_f e intensidad de la mancha obtenida a partir de la Solución muestra debe ser similar a la obtenida a partir de la Solución estándar.

C – Absorción infrarroja <460> - Examinar el residuo obtenido en el ensayo para Ftalato de bis(2-etilhexilo) comparando con el espectro obtenido con Ftalato de bis(2-etilhexil) SR-FA.

ENSAYOS –

Solución indicadora - Disolver en alcohol 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de metilo y 200 mg de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el mismo solvente y filtrar.

Solución S₁ - Transferir 5,0 g del material a ensayar a una cápsula. Agregar 30 ml de ácido sulfúrico y calentar hasta obtener una masa viscosa negra. Enfriar y agregar con precaución 10 ml de solución de peróxido de hidrógeno al 30 % y calentar suavemente. Dejar enfriar y agregar 1 ml de solución de peróxido de hidrógeno al 30 %, repetir el agregado y evaporación de la solución de peróxido de hidrógeno al 30 % hasta obtener un líquido incoloro. Reducir el volumen hasta 10 ml. Enfriar y diluir a 50,0 ml con agua.

Solución S₂ - Transferir 25 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato. Agregar 500 ml de Agua para Inyectables y cubrir la boca del erlenmeyer con un vaso de precipitados de vidrio al borosilicato. Calentar en autoclave a 121 ± 2 °C durante 20 minutos. Dejar enfriar y decantar la solución. Diluir la solución a 500 ml.

Aspecto de la solución S₂ - Debe ser transparente e incolora.

Acidez o alcalinidad - A 100 ml de Solución S₂, agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a azul. A 100 ml de Solución S2, agregar 0,2 ml de naranja de metilo (SR). No se debe requerir más de 1,0 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el cambio de color del indicador de amarillo a anaranjado.

Absorbancia - Evaporar 100 ml de Solución S2 a sequedad. Disolver el residuo en 5 ml de hexano. Entre 250 y 310 nm la absorbancia no debe ser mayor de 0,25.

Sustancias reductoras - Efectuar el ensayo dentro de las 4 horas de preparada la Solución S₂. A 20,0 ml de Solución S₂ agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20,0 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco empleando 20 ml de Agua para Inyectables y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes consumidos no debe ser mayor de 2,0 ml.

Aminas aromáticas primarias –

Solución muestra - A 2,5 ml de Solución A₁ obtenida en la Identificación, agregar 6 ml de agua y 4 ml de ácido clorhídrico 0,1 M. Agitar vigorosamente y descartar la fase orgánica. A la fase acuosa agregar 0,4 ml de una solución de nitrito de sodio al 1 % recientemente preparada. Mezclar y dejar en reposo durante 1 minuto. Agregar 0,8 ml de una solución de sulfamato de amonio al 2,5 %, dejar en reposo durante 1 minuto y agregar 2 ml de una solución de diclorhidrato de N-(1-Naftil)etilendiamina al 0,5 %. [NOTA: realizar el ensayo a bajas temperaturas.]

Solución estándar - Proceder según se indica para la Solución muestra, reemplazando la fase acuosa por una mezcla de 1 ml de una solución de naftilamina 0,001 % en ácido clorhídrico 0,1 M, 5 ml de agua y 4 ml de ácido clorhídrico 0,1 M (20 ppm).

Después de 30 minutos, el color de la Solución muestra no debe ser más intenso que el de la Solución estándar preparada al mismo tiempo.

N,N’ diaciletilendiaminas - Lavar con etanol el precipitado B₂ obtenido en la Identificación y contenido en el filtro de vidrio sinterizado previamente pesado. Secar hasta peso constante sobre pentóxido de fósforo y pesar el filtro. El precipitado no debe pesar más de 20 mg.

Aceites epoxidados –

Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía de 1 mm de espesor.

Fase móvil - Tolueno.

Procedimiento - Aplicar sobre la placa, en forma de banda de 30 mm por 3 mm, 0,5 ml de Solución A₁ obtenida en la Identificación. Dejar secar la aplicación y desarrollar el cromatograma hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente tres cuartos de la longitud de la placa. Retirar la placa de la cámara, marcar el frente del solvente. Secar la placa cuidadosamente. Exponer la placa a vapores de iodo durante 5 minutos. Examinar el cromatograma y localizar la banda con un R_f de 0 y, si estuviera presente, la banda secundaria con un R_f de aproximadamente 0,7, ambas correspondientes a aceites epoxidados. Remover el área del gel de sílice que corresponde a la banda o bandas. En forma similar remover un área de gel de sílice para preparar un blanco. Separadamente agitar ambas muestras durante 15 minutos con 40 ml de metanol. Filtrar y evaporar a sequedad. Pesar los dos residuos. La diferencia entre los pesos no debe ser mayor de 10 mg.

Ftalato de bis(2-etilhexilo) - Examinar el cromatograma obtenido en el ensayo para Aceites epoxidados bajo luz ultravioleta a 254 nm y localizar la zona que corresponde a ftalato de bis(2-etilhexilo). Remover el área del gel de sílice que corresponde a esta zona y agitarla con 40 ml de éter. Filtrar sin pérdidas y evaporar a sequedad. El residuo obtenido no debe pesar más de 40 mg.

Cloruro de vinilo -

Sistema cromatográfico (ver 100. Cromatografía) - Emplear un cromatógrafo de gases equipado con un detector de ionización a la llama, y una columna de 3 m x 3 mm rellena con tierra de diatomea silanizada para cromatografía impregnada con 5 % p/p de dimetil estearilamida y 5 % p/p de polietilenglicol 400. Mantener la columna, el inyector y el detector a aproximadamente 45, 100 y 150 °C, respectivamente. Se emplea nitrógeno como gas transportador con un caudal de aproximadamente 30 ml por minuto.

Solución del estándar interno - Empleando una microjeringa, transferir 10 µl de éter en 20,0 ml de N,N-Dimetilacetamida, sumergiendo la punta de la aguja en el solvente. Inmediatamente antes de usar, diluir la solución 1 en 1.000 con N,N-Dimetilacetamida.

Solución madre del estándar de cloruro de vinilo - Preparar bajo una campana extractora. Transferir 50,0 ml de N,N-Dimetilacetamida a un recipiente de 50 ml, tapar el recipiente y pesar a la décima de mg. Llenar una jeringa de 50 ml de polietileno o polipropileno con cloruro de vinilo gaseoso, dejar que el gas este en contacto con la jeringa aproximadamente 3 minutos, vaciar la jeringa y llenar nuevamente con 50 ml de cloruro de vinilo gaseoso. Adaptar una aguja hipodérmica a la jeringa y reducir el volumen de gas en la jeringa hasta 25 ml. Inyectar estos 25 ml de cloruro de vinilo lentamente en el recipiente y agitarlo suavemente evitando el contacto entre el líquido y la aguja. Pesar el recipiente nuevamente, el aumento de peso es de aproximadamente 60 mg (1 µl de la solución así obtenida contiene aproximadamente 1,2 µg de cloruro de vinilo).

Solución estándar de cloruro de vinilo - A 1 volumen de Solución madre del estándar de cloruro de vinilo agregar 3 volúmenes de N,N-Dimetilacetamida.

Soluciones estándar - Transferir 10,0 ml de Solución del estándar interno a cada uno de seis recipientes de 50 ml. Cerrar los recipientes. Inyectar 1; 2; 3; 5 y 10 µl, respectivamente, de Solución estándar de cloruro de vinilo en cinco de los recipientes. Las seis soluciones así obtenidas contienen respectivamente, 0 µg; aproximadamente 0,3; 0,6; 0,9; 1,5 y 3 µg de cloruro de vinilo. Agitar, evitando el contacto entre el tapón y el líquido. Colocar los recipientes en un baño de agua a 60 ± 1 °C durante 2 horas.

Solución muestra - Transferir 1,0 g del material a ensayar a un recipiente de 50 ml y agregar 10,0 ml de Solución del estándar interno. Cerrar el recipiente. Agitar, evitando el contacto entre el tapón y el líquido. Colocar el recipiente en un baño de agua a 60 ± 1 °C durante 2 horas.

Procedimiento – Inyectar por separado en el cromatógrafo 1 ml del espacio libre superior de cada recipiente, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos principales. Calcular el contenido de cloruro de vinilo. No debe estar presente más de 1 ppm de cloruro de vinilo.

Fósforo total –

Solución estándar - Mezclar 0,5 ml de una solución de fosfato monobásico de potasio que contiene 0,219 g por litro, 10 ml de agua y 25 ml de molibdovanádico (SR) y diluir a 50,0 ml con agua (100 ppm).

Solución muestra - Calcinar 0,25 g del material a ensayar en un crisol de platino con 0,2 g de carbonato de sodio anhidro y 50 mg de nitrato de potasio. Después de enfriar tomar el residuo con agua, y transferir a un matraz aforado de 50 ml. Lavar el crisol con agua, agregar los lavados al matraz, acidificar con ácido sulfúrico al 60 % p/p hasta que cese la efervescencia. Agregar 25 ml de molibdovanádico (SR) y diluir a 50,0 ml con agua.

El ensayo es válido si la coloración amarilla producida en la Solución muestra no es más intensa que la de la Solución estándar.

Bario –

Solución estándar - Mezclar 1,2 ml de una solución, preparada disolviendo 0,178 g de cloruro de bario dihidratado en 100,0 ml, diluida 1 en 20 (50 ppm de Ba); 0,8 ml de agua y 3 ml de solución de sulfato de calcio, preparada agitando 5 g de sulfato de calcio con 100 ml de agua durante 1 hora, y filtrar.

Solución muestra - Calcinar 2,0 g del material a ensayar en un crisol de sílice. Mezclar el residuo con 10 ml de ácido clorhídrico y evaporar a sequedad en un baño de agua. Tomar este residuo con dos porciones de 1 ml de agua. Filtrar y agregar 3 ml de solución de sulfato de calcio preparada agitando 5 g de sulfato de calcio con 100 ml de agua durante 1 hora y filtrar.

El ensayo es válido si la opalescencia de la Solución muestra no es más intensa que la de la Solución estándar.

Cadmio - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver 0,100 g de cadmio en el menor volumen posible de una mezcla de ácido, clorhídrico y agua (50:50). Diluir a 100,0 ml con ácido clorhídrico al 1 % v/v para obtener una solución de concentración conocida de 0,1 % de Cd.

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con ácido clorhídrico al 1 % v/v.

Solución muestra - Evaporar 10 ml de la Solución S1 a sequedad. Tomar el residuo con 5 ml de ácido clorhídrico al 1 % v/v, filtrar y diluir el filtrado a 10,0 ml con el mismo ácido.

Procedimiento - Medir la absorbancia a 228,8 nm empleando una lámpara de cadmio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de aire-acetileno. No debe estar presente más de 0,6 ppm de Cd.

Calcio - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Inmediatamente antes de usar, diluir 1 en 10 con agua una solución preparada con 1,000 g de carbonato de calcio y 23 ml de ácido clorhídrico 1 M y diluida a 100,0 ml con agua (400 ppm de Ca).

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar, diluida con agua.

Solución muestra - Calcinar 2,0 g del material a ensayar en un crisol de sílice. Mezclar el residuo con 10 ml de ácido clorhídrico y evaporar a sequedad en un baño de agua. Tomar este residuo con 5 ml de agua, filtrar y diluir a 25,0 ml con el mismo solvente.

Procedimiento - Medir la absorbancia a 422,7 nm empleando una lámpara de calcio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de aire-acetileno. No debe estar presente más de 0,07 % de Ca.

Metales pesados –

Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Disolver 25,0 g de acetato de amonio en 25,0 ml de agua y agregar 38,0 ml de ácido clorhídrico al 25 %. Ajustar a pH 3,5 si fuera necesario, con ácido clorhídrico 2 M o con amoníaco diluido y diluir a 100 ml con agua.

Solución estándar - Proceder según se indica para la Solución muestra empleando una mezcla de 10 ml de Solución estándar de plomo diluida 1:5 (ver 590. Límite de metales pesados) y 2 ml de la Solución muestra.

Solución muestra - A 10 ml de Solución S1 agregar 0,5 ml de fenolftaleína (SR) y luego solución concentrada de hidróxido de sodio al 42 % hasta obtener un color rosa pálido. Diluir a 25 ml con agua. A 12 ml de la solución así obtenida agregar 2 ml de Solución reguladora de acetato pH 3,5 y mezclar. A continuación agregar 1,2 ml de tioacetamida-glicerina básica (SR) y mezclar inmediatamente.

Solución blanco - Proceder según se indica para la Solución muestra empleando una mezcla de 10 ml de agua y 2 ml de la Solución muestra.

Después de 2 minutos, la coloración parda de la Solución muestra no debe ser más intensa que la de la Solución estándar.

Estaño –

Solución muestra - A 10 ml de Solución S1 agregar 0,3 ml de ácido tioglicólico y 30 ml de agua. Mezclar y agregar 2 ml de una solución de lauril sulfato de sodio al 1 % y 1 ml de una solución de ditiol, recientemente preparada, que contiene 5 g/l en etanol y diluir a 50 ml con agua.

Solución madre del estándar - Disolver 0,500 g de estaño en una mezcla de 5 ml de agua y 25 ml de ácido clorhídrico, y diluir a 1 litro. Inmediatamente antes de usar transferir 1 ml de esta solución a una matraz aforado de 100 ml y diluir a volumen con ácido clorhídrico al 2,5 %v/v (5 ppm de Sn).

Solución estándar - Proceder según se indica para la Solución muestra, empleando 10 ml de ácido sulfúrico al 20 % v/v y 6 ml de Solución madre del estándar.

Después de 15 minutos, el color de la Solución muestra no debe ser más intenso que el de la Solución estándar.

Cinc - [NOTA: preparar un blanco empleando 10 ml de agua. El ensayo no es válido a menos que la fase inferior obtenida con el blanco sea de color verde.]

Solución reguladora de acetato de pH 4,4 - Disolver 136 g de acetato de sodio y 77 g de acetato de amonio en agua y diluir a 100 ml con el mismo solvente. Agregar 250,0 ml de ácido acético glacial y mezclar.

Solución muestra - Diluir 1 ml de Solución S1 a 100 ml con agua. A 10 ml de la solución resultante agregar 5 ml de Solución reguladora de acetato de pH4,4; 1 ml de tiosulfato de sodio 0,1 M y 5,0 ml de una solución de ditizona en cloroformo que contiene 0,01 g/1 y agitar.

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de sulfato de cinc, equivalente a 0,440 g de ZnSO₄ . 7H₂O, en agua. Agregar 1 ml de ácido acético y diluir a 100 ml con agua. Diluir 1 ml de esta solución a 10 ml con agua. Antes de usar diluir 1 ml de esta solución a 10 ml con agua (10 ppm de Zn).

Solución estándar - Proceder según se indica para la Solución muestra, empleando una mezcla de 2 ml de una Solución madre del estándar y 8 ml de agua (0,2 %).

Después de 2 minutos, el color violeta de la fase inferior de la Solución muestra no debe ser más intenso que el de la fase inferior de la Solución estándar.

Residuo de evaporación - Evaporar a sequedad 50 ml de Solución S₂ en un baño de agua y secar entre 100 y 150 °C. El residuo no debe pesar más de 7,5 mg (0,3 %).

VALORACION

Llevar a cabo el método de combustión (ver 60. Combustión en erlenmeyer con oxígeno), empleando 50,0 mg del material a ensayar. Absorber los productos de combustión en 20 ml de hidróxido de sodio 1 N. A la solución obtenida agregar 2,5 ml de ácido nítrico, 10,0 ml de nitrato de plata 0,1 N, 5 ml de sulfato férrico amónico (SR) y 1 ml de ftalato de dibutilo. Titular con tiocianato de amonio 0,05 N hasta obtener un color amarillo-rojizo. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro de nitrato de plata 0,1 N equivale a 6,25 mg de poli(cloruro de vinilo).

Las poliolefinas se obtienen por polimerización de etileno o propileno o por copolimerización de estas sustancias con no más de 25 % de homólogos mayores (C4 a C10) o de ácidos carboxílicos o ésteres. Ciertos materiales pueden ser mezclas de poliolefinas.

Pueden contener hasta tres antioxidantes, uno o varios lubricantes o antibloqueantes. Cuando el material debe proveer protección de la luz se le agregan agentes opacantes como el dióxido de titanio.

Este texto es aplicable a todas las poliolefinas empleadas para propósitos médico-farmacéuticos con la excepción de los otros materiales poliolefínicos descriptos en este capítulo.

CARACTERISTICAS

Polvo, perlas, gránulos o, después de su transformación, láminas de espesor variable o envases. Prácticamente insolubles en agua, etanol, hexano y metanol; solubles en hidrocarburos aromáticos calientes. Se ablandan a temperaturas entre 65 y 165 °C. Se queman con una llama azul.

IDENTIFICACION

A - Absorción infrarroja <460>. A 0,25 g del material a ensayar agregar 10 ml de tolueno y calentar a reflujo durante 15 minutos. Colocar algunas gotas de la solución obtenida sobre una placa de cloruro de sodio y evaporar el solvente en una estufa a 80 °C. El espectro del material presenta máximos de absorción a 2.920; 2.850; 1.475; 1.465; 1.380; 1.170; 735 y 720 cm-1, el espectro obtenido debe ser idéntico al espectro obtenido con el material seleccionado como referencia. [NOTA: si el material a ensayar se presenta en forma de láminas, el espectro puede determinarse directamente sobre un trozo de tamaño apropiado.]

B - Debe cumplir con los Ensayos suplementarios para los aditivos presentes.

C - En un crisol de platino, mezclar aproximadamente 20 mg del material a ensayar con 1 g de sulfato ácido de potasio y calentar hasta fundir completamente. Dejar enfriar y agregar 20 ml de ácido sulfúrico diluido. Calentar suavemente y filtrar la solución resultante. Al filtrado agregar 1 ml de ácido fosfórico y 1 ml de solución de peróxido de hidrógeno al 30 %. Si la sustancia contiene dióxido de titanio como opacante, se desarrolla un color anaranjado-amarillento.

ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar las muestras del material a ensayar en trozos de tamaño apropiado.]

Solución S₁ - Transferir 25 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 500 ml de Agua para Inyectables y calentar a reflujo durante 5 horas. Dejar enfriar y decantar. Reservar una porción de la solución para el ensayo de Aspecto de la solución S₁ y filtrar el resto a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media. Emplear la Solución S₁ dentro de las 4 horas de su preparación.

Solución S₂ - Transferir 2,0 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 80 ml de tolueno y calentar a reflujo con agitación constante durante 90 minutos. Enfriar a 60 °C y agregar, con agitación constante, 120 ml de metanol. Filtrar la solución a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media. Lavar el erlenmeyer y el filtro con 25 ml de una mezcla de 40 ml de tolueno y 60 ml de metanol, agregar el lavado al filtrado y diluir a 250 ml con la misma mezcla. Preparar un blanco.

Solución S₃ - Transferir 100 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 250 ml de ácido clorhídrico 0,1 M y calentar a reflujo con agitación constante durante 1 hora. Dejar enfriar y decantar la solución.

Solución indicadora - Disolver en alcohol 0,1 g de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de metilo y 0,2 g de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el mismo solvente y filtrar.

Aspecto de la solución S₁ - La Solución S₁ debe ser transparente e incolora.

Acidez o alcalinidad - A 100 ml de la Solución S₁ agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a azul. A 100 ml de Solución S₁ agregar 0,2 ml de naranja de metilo (SR). No se debe requerir más de 1 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el cambio de color del indicador de amarillo a anaranjado.

Absorbancia - Entre 220 y 340 nm, la absorbancia de la Solución S₁ no debe ser mayor de 0,2.

Sustancias reductoras - A 20 ml de la Solución S₁ agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes no debe ser mayor de 3,0 ml.

Metales pesados extraíbles –

Solución reguladora de acetato pH 3,5 - Disolver 25,0 g de acetato de amonio en 25,0 ml de agua y agregar 38,0 ml de ácido clorhídrico al 25 %. Ajustar a pH 3,5 si fuera necesario, con ácido clorhídrico 2 M o con amoníaco diluido y diluir a 100 ml con agua.

Solución muestra - Concentrar 50 ml de Solución S3 hasta aproximadamente 5 ml en baño de agua y diluir a 20 ml con agua. A 12 ml de la solución así obtenida agregar 2 ml de Solución reguladora de acetato pH 3,5 y mezclar. A continuación agregar 1,2 ml de tioacetamida-glicerina básica (SR) y mezclar inmediatamente.

Solución estándar - Proceder según se indica para la Solución muestra empleando una mezcla de 2,5 ml de Solución estándar de plomo (ver 590. Límite de metales pesados) y 2 ml de la Solución muestra.

Solución blanco - Proceder según se indica para la Solución muestra empleando una mezcla de 10 ml de agua y 2 ml de la Solución muestra.

Después de 2 minutos, la coloración parda de la Solución muestra no debe ser más intensa que la de la Solución estándar. No deben encontrarse más de 2,5 ppm.

Residuo de ignición <270> - No más de 1,0 %, determinado sobre 5,0 g. Este límite no se aplica a los materiales que contienen dióxido de titanio como opacante.

ENSAYOS SUPLEMENTARIOS - [NOTA: estos ensayos se realizan totalmente o en parte sólo si son requeridos de acuerdo a la composición o el uso del material.]

Antioxidantes fenólicos –

Sistema cromatográfico - Emplear un equipo para cromatografía de líquidos con un detector ultravioleta ajustado a 280 nm y una columna de 25 cm x 4,6 mm con fase estacionaria constituida por octadecilsilano químicamente unido a partículas de sílice porosa de 5 µm de diámetro.

Fase móvil - Se puede emplear una de las cuatro mezclas siguientes:

Fase móvil 1 - Acetonitrilo y agua (70:30) con un caudal de aproximadamente 2 ml por minuto.

Fase móvil 2 - Acetonitrilo, tetrahidrofurano y agua (60:30:10) con un caudal de aproximadamente 1,5 ml por minuto.

Fase móvil 3 - Metanol, 2-propanol y agua (50:45:5) con un caudal de aproximadamente 1,5 ml por minuto.

Fase móvil 4 - Acetonitrilo y tetrahidrofurano (80:20) con un caudal de aproximadamente 1,5 ml por minuto.

[NOTA: de las siguientes Soluciones estándar, preparar únicamente las necesarias para el ensayo de los antioxidantes fenólicos declarados en la composición del material a ensayar.]

Solución estándar A - Disolver 25 mg de butilhidroxitolueno y 60 mg de 3,3-bis(3-terbutil-4-hidroxifenil)butirato de etileno en 10 ml de una mezcla acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar B - Disolver 60 mg de tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)-propionato] de pentaeritritilo y 60 mg de 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil-1,3,5 bencenotriil)trismetileno]trifenol en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar C - Disolver 60 mg de 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo y 60 mg de fosfito tris(2,4-di-ter-butilfenilo) en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 50 mI con el mismo solvente.

Solución estándar D - Disolver 25 mg pie butilhidroxitolueno en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar E - Disolver 60 mg de 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar F - Disolver 60 mg de 1,3,5-tris[3,5di-ter-butil-4-hidroxibencil]-striazina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar G - Disolver 60 mg de tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato] de pentaeritritilo en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar H – Disolver 60 mg de 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil-1,3,5 bencenotriil)trismetileno]trifenol en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar 1 - Disolver 60 mg de 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar J - Disolver 60 mg de fosfito de tris (2,4-di-ter-butilfenilo) en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar K - Disolver 20 mg de P-EPQ en 10 ml de una mezcla de volúmenes iguales de acetonitrilo y una solución de hidroperóxido de terbutilo en tetrahidrofurano con una concentración de 10 g/1. Dejar reposar en un recipiente cerrado durante 1 hora. Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50).

Solución muestra S₂₁ - Evaporar 50 ml de la solución S₂ a sequedad al vacío a 45 °C. Disolver el residuo en 5 ml de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Preparar una solución blanco a partir del blanco correspondiente a la Solución S₂.

Solución muestra S₂₂ - Evaporar 50 ml de la Solución S₂ a sequedad al vacío a 45 °C. Disolver el residuo con 5 ml de cloruro de metileno. Preparar una solución blanco a partir de la solución blanco que corresponde a la Solución S₂.

Solución muestra S₂₃ - Evaporar 50 ml de la Solución S₂ a sequedad al vacío a 45 °C. Disolver el residuo con 5 ml de una mezcla de volúmenes iguales de acetonitrilo y una solución de hidroperóxido de terbutilo en tetrahidrofurano con una concentración de 10 g/1. Cerrar el matraz y dejar reposar durante 1 hora. Preparar una solución blanco a partir de la solución blanco que corresponde a la Solución S₂.

Aptitud del sistema - (ver 100. Cromatografía) - Cromatografiar la Solución estándar A, empleando Fase móvil 1, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución, R, entre los picos de butilhidroxitolueno y 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno no debe ser menor de 8. Cromatografiar la Solución estándar B, empleando Fase móvil 2, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución, R, entre los picos de tetrakis [3-(3,5- ter-butil-4-hidroxi-fenil)propionato] de pentaeritritilo y 2,2',2",6,6',6"-hexater-butil-4,4',4"-[(2,4,6-tri-metil-1,3,5-bencenotriil)tris-metileno]trifenol no debe ser menor de 2. Cromatografiar la Solución estándar C, empleando Fase móvil 3, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución, R, entre los picos de 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo y fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo) no debe ser menor de 2. Cromatografiar la Solución estándar E, empleando Fase móvil 4, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución, R, entre los picos principales (con tiempos de retención de aproximadamente 3,5 y 5,8) no debe ser menor de 6.

Procedimiento –

Emplear Fase móvil 1 si el material a ensayar contiene butilhidroxitolueno y/o 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)-butirato de etileno. Inyectar por separado en el cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente 20 µl) de la Solución muestra S21, el blanco correspondiente, la Solución estándar A, y las Soluciones estándar D o E o 20 µl de las Soluciones estándar D y E.

Emplear Fase móvil 2 si el material a ensayar contiene uno o varios de los siguientes antioxidantes:

- 1,3,5-tris(3,5-di-ter-butil-4-hidroxibencil)-s-triazina-2,4,6(1H,3H,5H)-triona,

- tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato] de pentaeritritilo,

- 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil-1,3,5-bencenotriil) trismetileno] trilfenol,

- 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo,

- fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo),

Inyectar por separado en el cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente 20 µl) de la Solución muestra S₂₁, el blanco correspondiente, la Solución estándar B y cada una de las Soluciones estándar de antioxidantes de la lista anterior que son declarados en la composición.

Emplear Fase móvil 3 si el material a ensayar contiene 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil) propionato de octadecilo y/o fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo). Inyectar por separado en el cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente 20 µl) de la Solución muestra S22, el blanco correspondiente, la Solución estándar C, y la Solución estándar I o J o 20 µl de las Soluciones estándar I y J.

Emplear Fase móvil 4 si la sustancia a ensayar contiene P-EPQ. Inyectar por separado en el cromatógrafo volúmenes iguales (aproximadamente 20 µl) de la Solución muestra S₂₃, el blanco correspondiente y la Solución, estándar K.

En todos los casos registrar los cromatogramas durante 30 minutos. Los cromatogramas correspondientes a las Soluciones muestra S₂₁, S₂₂ y S₂₃ deben presentar únicamente picos debidos a los antioxidantes declarados en la composición y otros picos menores que también aparecen en los cromatogramas correspondientes a los blancos. Las respuestas de los picos de las Soluciones muestra S₂₁, S₂₂ y S₂₃ deben ser menores que las respuestas correspondientes a los picos obtenidos a partir de las Soluciones estándar D a K.

Antioxidantes no-fenólicos –

Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil 1 - Hexano.

Fase móvil 2 - Cloruro de metileno.

Solución estándar L - Disolver 60 mg de 2,2'-bis(octadeciloxi)-5,5'-espirobi [1,3,2-dioxafosforinano] en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro de metileno acidificado (SR).

Solución estándar M - Disolver 60 mg de disulfuro de dioctadecilo en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro de metileno acidificado (SR).

Solución estándar N - Disolver 60 mg de 3,3'-tiodipropionato de didodecilo en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro de metileno acidificado (SR).

Solución estándar O - Disolver 60 mg de 3,3'-tiodipropionato de dioctadecilo en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro de metileno acidificado (SR).

Solución, estándar P - Disolver 60 mg de 3,3'-tiodipropionato de didodecilo y 60 mg de 3,3'-tiodipropionato de dioctadeciIo en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 10 ml con cloruro de metileno acidificado (SR).

Solución muestra S₂₄ - Evaporar 100 ml de la Solución S₂ a sequedad en vacío a 45 °C. Disolver el residuo en 2 ml de cloruro de metileno acidificado (SR).

Revelador - Preparar una solución de iodo al 1 % en etanol.

Procedimiento - Aplicar por separado sobre la placa 20 µl de la Solución muestra S₂₄, 20 µl de la Solución estándar P y 20 µl de cada una de las Soluciones estándar que corresponden a todos los antioxidantes fenólicos y no-fenólicos presentes en la composición del material a ensayar. Dejar secarlas aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 18 cm empleando Fase móvil 1. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar. Desarrollar nuevamente los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 17 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de la cámara, marcar el frente del solvente y dejarla secar. Examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm. Pulverizar sobre la placa con Revelador, dejar secar durante 10 a 15 minutos y examinar bajo luz ultravioleta a 254 nm. Cualquier mancha en el cromatograma de la Solución muestra S₂₄ no debe ser más intensa que las manchas correspondientes obtenidas a partir de las Soluciones estándar. El ensayo no es válido a menos que el cromatograma de la Solución estándar P presente dos manchas claramente separadas.

Amidas y estearatos –

Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil 1 - 2,2,4-Trimetilpentano y etanol (75:25).

Fase móvil 2 - Hexano.

Fase móvil 3 - Cloruro de metileno y metanol (95:5).

Solución estándar Q - Disolver 20 mg de ácido esteárico en 10 ml de cloruro de metileno.

Solución estándar R - Disolver 40 mg de oleamida en 20 ml de cloruro de metileno.

Solución estándar S - Disolver 40 mg de erucamida en 20 ml de cloruro de metileno.

Solución muestra - Solución S24 preparada en Antioxidantes no fenólicos.

Revelador 1 - Solución de 2,6-Diclorofenol-indofenol sódico al 0,2 % en etanol.

Revelador 2 - Solución de ácido fosfomolíbdico al 4 % en etanol.

Procedimiento - Aplicar sobre dos placas 10 µl de la Solución S24. Aplicar sobre la primera placa 10 µl de la Solución estándar Q y aplicar sobre la segunda placa 10 µl de las Soluciones estándar R y S. Dejar secar las aplicaciones. Desarrollar la primera placa, hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 1. Retirar la placa de la cámara, marcar el frente del solvente y dejarla secar al aire. Pulverizar sobre la placa con Revelador 1. Calentar en una estufa a 120 °C durante unos minutos para intensificar las manchas. Cualquier mancha que corresponda a ácido esteárico en el cromatograma de la Solución muestra S₂₄ debe ser idéntica en posición (Rf aproximadamente de 0,5) pero no más intensa que la mancha obtenida a partir de la Solución estándar Q.

Desarrollar la segunda placa hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar al aire. Desarrollar nuevamente hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 3. Retirar la placa de la cámara y marcar el frente del solvente. Dejar secar la placa. Pulverizar sobre la placa con Revelador 2. Calentar en una estufa a 120 °C hasta que aparezcan las manchas. Las manchas que corresponden a erucamida u oleamida en el cromatograma de la Solución muestra S₂₄ deben ser idénticas en posición (Rf aproximadamente de 0,2) pero no más intensas que las manchas obtenidas a partir de las Soluciones estándar R y S.

Sustancias solubles en hexano - Transferir 10 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de 250 ml con boca esmerilada. Agregar 100 ml de hexano y calentar a reflujo durante 4 horas, agitando constantemente. Enfriar en un baño de hielo y filtrar rápidamente (el tiempo de filtración debe ser menor de 5 minutos, si es necesario la filtración puede ser acelerada aplicando presión sobre la solución) a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media manteniendo la solución a aproximadamente 0 °C. Evaporar 20 ml del filtrado en un cristalizador previamente pesado en un baño de agua. Secar el residuo en una estufa entre 100 y 105 °C durante 1 hora. El peso del residuo obtenido debe ser igual al del residuo obtenido a partir del material de referencia, con una desviación máxima de ± 10 % y dicho peso no debe ser mayor de 5 %.

Aluminio extraíble - (ver 440. Espectrofotometría de absorción, y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver en agua una cantidad de sulfato de potasio y aluminio, equivalente a 352 mg de AIK(SO₄)₂ . 12H₂O. Agregar 10 ml de ácido sulfúrico diluido y diluir a 100 ml con agua (200 ppm de A1).

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con ácido clorhídrico 0,1 M.

Solución muestra - Evaporar a sequedad 100 ml de Solución S3 en un baño de agua. Disolver el residuo en 2 ml de ácido clorhídrico y diluir a 10 ml con ácido clorhídrico 0,1 M.

Procedimiento - Medir la absorbancia a 309,3 mm empleando una lámpara de aluminio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de óxido nitroso-acetileno. No debe estar presente más de 1 ppm de Al extraíble.

Titanio extraíble - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución muestra – Evaporar a sequedad 100 ml de Solución S₃ en un baño de agua. Disolver el residuo en 2 ml de ácido clorhídrico y diluir a 10,0 ml con ácido clorhídrico 0,1 M.

Solución madre del estándar - Disolver 100,0 mg de titanio en 100 ml de ácido clorhídrico diluido hasta 150 ml con agua, calentando si fuera necesario. Dejar enfriar y diluir a 1 litro con agua (100 ppm de Ti).

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con ácido clorhídrico 0,1 M.

Procedimiento - Medir la absorbancia a 364,3 nm empleando una lámpara de titanio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de óxido nitroso-acetileno. No debe estar presente más de 1 ppm de Ti extraíble.

Cinc extraíble - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de sulfato de cinc, equivalente a 440 mg de ZnSO₄ . 7H₂O, en agua agregar 1 ml de ácido acético y diluir a 100 ml con agua. Diluir 1 ml de esta solución a 10 ml con agua. Antes de usar, diluir 1 ‘ml de esta solución a 10 ml con agua (10 ppm de Zn).

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando una Solución madre del estándar diluida con ácido clorhídrico 0,1 M.

Solución muestra - Solución S₃.

Procedimiento - Medir la absorbancia a 213,9 nm empleando una lámpara de cinc de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de acetileno-aire. No debe estar presente más de 1 ppm de Zn extraíble.

LIMITES DE ADITIVOS

El polietileno de baja densidad que cumple con los siguientes requisitos se emplea en la fabricación de envases para preparaciones de uso parenteral y oftálmico.

El polietileno de baja densidad se obtiene por polimerización de etileno a altas presiones en presencia de oxígeno o catalizadores. El material no debe poseer aditivos.

CARACTERISTICAS

Perlas, gránulos, láminas translúcidas de espesor variable, prácticamente insoluble en agua, etanol y metanol. Se ablanda por encima de los 80 °C. Se quema con una llama azul.

IDENTIFICACION

A - Absorción infrarroja <460>. A 250 mg del material a ensayar, agregar 10 ml de tolueno y calentar a reflujo durante 15 minutos. Colocar unas gotas de la solución sobre un disco de cloruro de sodio y evaporar el solvente a 80 °C. El espectro del material a ensayar debe presentar máximos en particular a 2920; 2850; 1465; 731 y; 722 cm-1; y el espectro debe ser idéntico al obtenido con el material seleccionado como referencia. [NOTA: si el material a ensayar se presenta en forma de láminas, el espectro puede determinarse directamente sobre un trozo de tamaño apropiado.]

B - A 2 g de material a ensayar agregar 100 ml de agua y calentar a reflujo durante 2 horas. Dejar enfriar. La densidad relativa del material (ver 160. Determinación de la densidad relativa) debe estar entre 0,910 y 0,935.

ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar el material en trozos de tamaño apropiado.]

Solución indicadora - Disolver en alcohol 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de metilo y 0,2 g de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el mismo solvente y filtrar.

Solución S - Transferir 25 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 500 ml de agua y calentar a reflujo durante 5 horas. Dejar enfriar y decantar.

Aspecto de la solución - La Solución S debe ser transparente, incolora y prácticamente inodora.

Acidez o alcalinidad - A 100 ml de Solución S agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a azul. A 100 ml de la Solución S agregar 0,2 ml de naranja de metilo (SR). No se debe requerir más de 1,0 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el cambio de color del indicador de amarillo a anaranjado.

Sustancias solubles en hexano - Transferir 5 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 50 ml de hexano, adaptar un refrigerante y calentar en un baño de agua con agitación constante durante 4 horas. Enfriar en un baño de hielo, se puede formar un gel. Adaptar una camisa de enfriamiento, llena de agua helada, a un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media adaptado con un dispositivo que permite aplicar presión durante la filtración.

Dejar enfriar el filtro durante 15 minutos. Filtrar la solución de hexano aplicando una presión de 27 kPa sin lavar el residuo; el tiempo de filtración no debe exceder 5 minutos. Evaporar 20 ml de la solución hasta sequedad. Secar el residuo a 100 °C durante 1 hora. El residuo no debe pesar más de 60 mg (3 %).

Sustancias reductoras - A 20 mI de Solución S agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes no debe ser mayor de 0,5 ml.

Aditivos –

Fase estacionaria - Emplear una placa para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil 1 - Hexano.

Fase móvil 2 - Cloruro de metileno y metanol (95:5).

Solución muestra - Transferir 2,0 g del material a ensayar y 5 ml de cloroformo a un recipiente de 10 ml de paredes gruesas de vidrio tipo I ó II (ver 430. Envases de vidrio). Cerrar el mismo con un tapón de goma recubierto con politetrafluoretileno. Colocar el recipiente en un baño de agua a 85 °C durante 2 horas. Retirarlo, invertirlo y dejarlo enfriar. Decantar la solución clorofórmica transparente.

Solución estándar - Disolver 20 mg de disulfuro de dioctadecilo y 20 mg de bis[3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato] de etileno en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Revelador - Solución de ácido fosfomolíbdico al 4 % en alcohol.

Procedimiento - Aplicar por separado sobre la placa 10 µl de cada solución. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase móvil 1. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar al aire. Desarrollar nuevamente los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar al aire. Pulverizar sobre con Revelador y calentar a 120 °C hasta que las manchas aparezcan en el cromatograma de la Solución estándar. No debe aparecer ninguna mancha en el cromatograma de la Solución muestra, a excepción de una mancha que puede estar en el frente del solvente del primer desarrollo y que corresponde a oligómeros. El cromatograma de la Solución estándar debe presentar dos manchas diferenciadas.

Residuo de ignición - <270>. No debe ser mayor de 200 ppm, determinado sobre 10 g.

El polietileno de alta densidad que cumple con los siguientes requisitos es apropiado para la fabricación de envases y tapones destinados a preparaciones de uso parenteral.

El polietileno de alta densidad (también llamado de "baja presión") es obtenido por polimerización de etileno a baja presión en presencia de catalizadores.

LIMITES DE ADITIVOS Y ESTABILIZANTES

CARACTERISTICAS

Polvo, perlas, gránulos o láminas translúcidas de espesor variable. Es prácticamente insoluble en agua, etanol, hexano y metanol; soluble en caliente en hidrocarburos aromáticos. Se ablanda a temperaturas mayores de 120 °C. Se quema con una llama azul.

IDENTIFICACION

A - Absorción infrarroja <460>. A 250 mg del material a ensayar agregar 10 ml de tolueno y calentar a reflujo durante aproximadamente 15 minutos. Colocar unas gotas de la solución sobre una placa de cloruro de sodio y evaporar el solvente a 80 °C. Los máximos de absorción en el espectro obtenido con el material ensayado deben corresponder en posición e intensidad relativa a los del espectro obtenido con el polietileno de alta densidad SR-FA. [NOTA: si el material a ensayar se presenta en forma de láminas, el espectro puede determinarse directamente sobre un trozo de tamaño apropiado.]

B - A 2 g del material a ensayar agregar 100 ml de agua, calentar a reflujo durante 2 horas y dejar enfriar. La densidad relativa del material (ver 160. Determinación de la densidad relativa) debe estar entre 0,935 y 0,965.

ENSAYOS

[NOTA: si es necesario, cortar el material en trozos de tamaño apropiado.]

Solución indicadora - Disolver en alcohol 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de metilo y 200 mg de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el mismo solvente y filtrar.

Solución S₁ - Transferir 2,0 g de material a ensayar y 5 ml de cloroformo acidificado (SR) a un recipiente de 10 ml de paredes gruesas de vidrio tipo I ó II (ver 430. Envases de vidrio). Cerrar el recipiente con un tapón de goma cubierto con politetrafluoroetileno. Colocar el mismo en un baño de agua a 85 °C durante 2 horas. Invertirlo y enfriarlo. Decantar la solución clorofórmica transparente.

Solución S₂ - Transferir 25 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 500 ml de agua y calentar a reflujo durante 5 horas. Dejar enfriar y decantar la solución. Reservar una porción de la solución para el ensayo Aspecto de la solución S₂ y filtrar el resto a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media. Emplear dentro de las 4 horas de preparación.

Solución S₃ - Transferir 100 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 200 ml de ácido clorhídrico 0,1 M y calentar a reflujo con agitación constante durante 1 hora. Enfriar, filtrar y evaporar el filtrado a sequedad. Disolver el residuo en 2 ml de ácido clorhídrico y diluir a 10,0 ml con ácido clorhídrico 0,1 M.

Aspecto de la solución S₂ - Debe ser transparente e incolora.

Acidez o alcalinidad – A 100 ml de Solución S₂ agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a azul. A 100 ml de Solución S₂, agregar 0,2 ml de naranja de metilo (SR). No se deben requerir más de 1 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el cambio de color del indicador de amarillo a anaranjado.

Absorbancia - A longitudes de onda entre 220 y 340 nm, la absorbancia de la Solución S₂, no debe ser mayor de 0,2.

Sustancias reductoras - A 20 ml de Solución S₂ agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Dejar reposar a temperatura ambiente durante 15 minutos. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes no debe ser mayor de 0,5 ml.

Aditivos –

Fase estacionaria - Emplear tres placas para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil 1 - Hexano.

Fase móvil 2 - Cloruro de metileno y hexano (80:20).

Fase móvil 3 - Cloruro de metileno y metanol (95:5).

Solución estándar A - Disolver 5 mg de butilhidroxitolueno en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar B - Disolver 8 mg de tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxi-fenil)propionato] de pentaeritritilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar C - Disolver 8 mg de 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar D - Disolver 8 mg de 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar E - Disolver 8 mg de 2,2',2",6,6',6"-hexa-ter-butil-4,4',4"-[(2,4,6 trimetil-1,3,5 bencenotriil) trismetilen]trifenol en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar F - Disolver 8 mg de 2,2’-bis(octadeciloxi)5,5’-espirobi [1,3,2-dioxa-fosforinano] en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar G - Disolver 8 mg de 3,3’-tiodipropionato de didodecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar H - Disolver 8 mg de 3,3'-tiodipropionato de dioctadecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar I - Disolver 20 mg de ácido esteárico en cloroformo y diluir a 10 mI con el mismo solvente.

Solución muestra - Solución S₁

Revelador 1 - Solución de cloruro férrico al 5% recientemente preparada.

Revelador 2 - Solución de ferricianuro de potasio al 5%

Revelador 3 - Acido sulfúrico.

Revelador 4 - Solución de ácido fósfomolíbdico al 4% en alcohol.

Procedimiento - Aplicar por separado sobre cada placa 10 µl de cada solución. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatograrnas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase móvil 1. Retirar las placas de la cámara y dejarlas secar al aire.

Para la segunda placa, desarrollar nuevamente los cromatogramas en la misma dirección hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar al aire.

Para la tercera placa, desarrollar nuevamente los cromatogramas en la misma dirección hasta que el frente del sovente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 3. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar al aire.

Examinar la primera placa bajo luz ultravioleta a 254 nm. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar una mancha que corresponde a la mancha en el cromatograma de la Solución estándar A. Pulverizar sobre la placa con Revelador 1 y luego con Revelador 2. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar una mancha que corresponde a la mancha en el cromatograma de la Solución estándar A.

Pulverizar sobre la segunda placa con Revelador 1 y luego con Revelador 2. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar las manchas que corresponden a las manchas en los cromatogramas de las Soluciones estándar A, B y D. Pulverizar sobre la placa con Revelador 3 y calentarla a 120°C hasta que las manchas aparezcan en los cromatogramas de las Soluciones estándar F, G y H. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar las manchas que corresponden a esas soluciones en los cromatogramas de las Soluciones estándar.

Pulverizar sobre la tercera placa con Revelador 4 y calentar a 120°C hasta que aparezcan las manchas en los cromatogramas de las Soluciones estándar. Las manchas aparecen rápidamente en los cromatogramas de las Soluciones estándar A, B, C, D, E, F, G y H. La mancha en el cromatograma de la Solución estándar 1 debe aparecer más lentamente. El cromatograma de la Solución muestra no debe presentar más de tres manchas y éstas corresponden a las manchas en los cromatogramas de las Soluciones estándar A, B, C, D, E, F, G o H; debe presentar también una mancha que corresponde a la mancha en el cromatograma de la Solución estándar 1. Las manchas en el cromatograma de la Solución muestra no deben ser más intensas que las manchas correspondientes en los cromatogramas de las Soluciones estándar.

[NOTA: en el cromatograma de la Solución muestra cualquier mancha cercana al frente del solvente desde el primer desarrollo no debe tenerse en cuenta (polímeros de bajo peso molecular-relativo).].

Circonio - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de nitrato de circonilo, equivalente a 293 mg de [ZrO(NO₃)₂ - 2H₂O], en una mezcla de agua y ácido clorhídrico (8:2). Diluir a 100 ml con la misma mezcla de solventes para obtener una solución con una concentración conocida de 0,1% de Zr.

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con una mezcla de agua y ácido clorhídrico (8:2).

Solución muestra - Solución S₃

Procedimiento - Medir la absorbancia a 360,1 nm empleando una lámpara de circonio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de óxido nitroso-acetileno. No debe estar presente más de 100 ppm de Zr.

Cromo - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de dicromato de potasio, equivalente a 283 mg de K₂Cr₂O₇, en agua y diluir a 1 litro con el mismo solvente para obtener una solución que contenga 100 ppm de Cr.

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con una mezcla de agua y ácido clorhídrico (8:2).

Solución muestra - Solución S₃

Procedimiento - Medir la absorbancia a 358,0 nm empleando una lámpara de cromo de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de aire-acetileno. No debe estar presente más de 0,05 ppm de Cr.

Vanadio - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de vanadato de amonio, equivalente a 230 mg de NH₄VO₃, en agua y diluir a 100,0 ml con el mismo solvente (0,1% de V).

Solución estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con una mezcla de agua y ácido clorhídrico (8:2).

Solución muestra - Solución S₃

Procedimiento - Medir la absorbancia a 318,3 nm. empleando una lámpara de vanadio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de acetileno-óxido nitroso. No debe estar presente más de 10 ppm de V.

Residuo de ignición <270> - No más de 0,2%, determinado sobre 5 g.

El polipropileno consiste en un homopolímero de propileno o de un copolímero de propileno con hasta 20% de etileno o de una mezcla de polipropileno con hasta un 20% de polietileno.

LIMITES DE ADITIVOS Y ESTABILIZANTES

CARACTERISTICAS

Polvo, perlas, gránulos o láminas translúcidas de espesor variable. El polipropileno es prácticamente insoluble en agua, etanol y metanol; es también prácticamente insoluble en hexano el cual disuelve polímeros residuales de bajo peso molecular; ligeramente soluble en decalina, tetralina, tolueno y xileno a ebullición. Se ablanda a temperaturas por encima de 150°C. Se quema con una llama azul.

IDENTIFICACION

Absorción infrarroja <460>. A 250 mg del material a ensayar agregar 10 ml de tolueno y calentar a reflujo durante aproximadamente 15 minutos. Colocar unas gotas de la solución caliente sobre una placa de cloruro de sodio y evaporar el solvente a 80°C. Los máximos de absorción en el espectro obtenido corresponden en posición e intensidad relativa a los del espectro obtenido con polipropileno SR-FA. Los espectros de copolímeros y mezclas deben presentar un máximo adicional aproximadamente a 720 cm^-1. [NOTA: si el material a ensayar se presenta en forma de láminas, el espectro puede determinarse directamente sobre un trozo de tamaño apropiado].

ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar el material en trozos de tamaño apropiado].

Solución indicadora - Disolver en alcohol 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de metilo y 200 mg de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el mismo solvente y filtrar.

Solución S₁ – Transferir 2,0 g del material a ensayar y 5 ml de cloroformo acidificado (SR) a un recipiente de 10 ml de paredes gruesas de vidrio tipo I ó II (ver 430. Envases de vidrio). Cerrar el recipiente con un tapón elastomérico con una cubierta de politetrafluoroetileno y asegurar el tapón. Colocar el recipiente en un baño de agua a 85°C durante 2 horas. Retirarlo, invertirlo y dejarlo enfriar. Decantar la solución clorofórmica transparente.

Solución S₂ - Transferir 25 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 500 ml de agua y calentar a reflujo durante 5 horas. Dejar enfriar y decantar la solución. Reservar una porción de la solución para el ensayo Aspecto de la solución S₂ y filtrar el resto a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media.

Solución S₃ - Transferir 100 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 200 ml de ácido clorhídrico 0,1 M y calentar a reflujo con agitación constante durante 1 hora. Enfriar, filtrar y evaporar el filtrado a sequedad. Disolver el residuo en 2 ml de ácido clorhídrico y diluir a 10,0 ml con ácido clorhídrico 0,1 M.

Acidez o alcalinidad - A 100 ml de Solución S₂, agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No se deben requerir más de 1,5 ml de hidróxido de sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a azul. A 100 ml de Solución S2 agregar 0,2 ml de naranja de metilo (SR). No se debe requerir más de 1,0 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el cambio de color del indicador de amarillo a anaranjado.

Absorbancia - A longitudes de onda entre 220 y 340 nm, la absorbancia de la Solución S₂ no debe ser mayor de 0,5.

Sustancias reductoras – A 20 ml de la Solución S₂ agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes no debe ser mayor de 0,5 ml.

Sustancias solubles en hexano - Transferir 10 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 50 ml de hexano, adaptar un refrigerante y calentar en un baño de agua a 75°C con agitación constante durante 4 horas. Enfriar en agua helada y filtrar rápidamente a través de un filtro de vidrio sinterizado. Evaporar 10 ml del filtrado a sequedad en un recipiente, previamente pesado y secar el residuo entre 100 y 105°C durante 1 hora. El residuo no debe pesar más de 0,1 g (5%).

Fase estacionaria - Emplear tres placas para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromalografía) recubiertas con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil 1 - Hexano.

Fase móvil 2 - Cloruro de metileno y éter de petróleo (80:20).

Fase móvil 3 - Cloruro de metileno y metanol (95:5).

Solución estándar A - Disolver 5 mg de butilhidroxitolueno en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar B - Disolver 12 mg de tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato] de pentaeritritilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución _estándar C - Disolver 12 mg de 3-(3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar D - Disolver 12 mg de 3,3-bis(3-ter-butil-4-hidroxifenil)butirato de etileno en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar E - Disolver 12 mg de 2,2’,",6,6’,6"-hexa-ter-butil-4,4’,4"-[(2,4,6- trimetil-1,3,5-bencenotriil) trismetilen] trifenol en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar F - Disolver 12 mg de 2,2’-bis(octadeciloxi)-5,5’-espirobi [1,3,2-dioxafosforinano] en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar G - Disolver 12 mg de 3,3’-tiodipropionato de didodecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar H - Disolver 12 mg de 3,3’-tiodipropionato de dioctadecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar I - Disolver 8 mg de ácido esteárico en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución estándar J — Disolver 12 mg de disulfuro de dioctadecilo en cloroformo y diluir a 10 ml con el mismo solvente.

Solución muestra - Solución S₁

Revelador 1 - Solución de cloruro férrico al 5% recientemente preparada.

Revelador 2 - Solución de ferricianuro de potasio al 5%.

Revelador 3 - Acido sulfúrico.

Revelador 4 - Solución de ácido fosfomolíbdico al 4% en alcohol.

Procedimiento - Aplicar por separado sobre cada placa 10 µl de cada solución. Dejar secar las aplicaciones y desarrollar los cromatogramas hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase móvil 1. Retirar las placas de la cámara y dejarlas secar al aire.

Para la segunda placa, desarrollar nuevamente los cromatogramas en la misma dirección hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 2.

Para la tercera placa, desarrollar nuevamente los cromatogramas en la misma dirección hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 3.

Retirar las placas de las cámaras y dejarlas secar al aire. Examinar la primera placa bajo luz ultravioleta a 254 nm. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar una mancha que corresponde a la mancha en el cromatograma de la Solución estándar A y J. Pulverizar sobre la placa con Revelador 1 y luego con Revelador 2. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar una mancha que corresponde a la mancha en el cromatograma de la Solución están-dar A.

Pulverizar sobre la segunda placa con Revelador 1 y luego con Revelador 2. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar las manchas que corresponden a las manchas en los cromatogramas de las Soluciones estándar A, B, D y J. Pulverizar sobre la placa con Revelador 3 y calentar la placa a 120°C hasta que las manchas aparezcan en los cromatogramas de estas Soluciones estándar F, G y H. El cromatograma de la Solución muestra debe presentar manchas que corresponden a las presentes en los cromatogramas de estas soluciones estándar.

Pulverizar sobre la tercera placa con Revelador 4 y calentar a 120°C hasta que las manchas aparezcan en los cromatogramas de las Soluciones estándar. Las manchas aparecen rápidamente en los cromatogramas de las Soluciones estándar A, B, C, D, E, F, G y H. La mancha en el cromatograma de la Solución estándar 1 aparece más lentamente. El cromatograma de la Solución muestra no debe presentar más de tres manchas y éstas corresponden a Las manchas en los cromatogramas de las Soluciones estándar A, B, C, D, E, F, G o H; puede mostrar también una mancha que corresponde a la mancha en el cromatograma de la Solución estándar 1. Las manchas en el cromatograma de la Solución muestra no deben ser más intensas que las manchas correspondientes en los cromatogramas de las Soluciones estándar.

[NOTA: en el cromatograma de la Solución muestra, cualquier mancha cercana al frente del solvente empleado para el primer desarrollo no debe tenerse en cuenta (polímeros de bajo peso molecular relativo)].

Cromo - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de dicromato de potasio, equivalente a 0,283 g de K₂Cr₂O₇, en agua y diluir a 1 litro con el mismo solvente (100 ppm de Cr).

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con una mezcla de agua y ácido clorhídrico (8:2).

Solución muestra - Solución S₃

Procedimiento - Medir la absorbancia a 358,0 nm empleando una lámpara de cromo de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de aire-acetileno. No debe estar presentar más de 0,05 ppm de Cr.

Vanadio - (ver 440. Espectrofotometría de absorción y emisión atómica).

Solución madre del estándar - Disolver una cantidad de vanadato de amonio, equivalente a 0,230 g de NH₄VO₃, en agua y diluir a 100,0 ml con el mismo solvente (0,1% de V).

Soluciones estándar - Preparar las soluciones estándar empleando la Solución madre del estándar diluida con una mezcla de agua y ácido clorhídrico (8:2).

Solución muestra - Solución S₃

Procedimiento - Medir la absorbancia a 318,3 nm empleando una lámpara de vanadio de cátodo hueco como fuente de radiación y una llama de acetileno-óxido nitroso. No debe estar presente más de 10 ppm de V.

Residuo de ignición <270> - No más de 0,2%, determinado sobre 5 g.

El copolímero de etileno-acetato de vinilo se obtiene por copolimerización de mezclas de etileno y acetato de vinilo. Contiene una cantidad definida de acetato de vinilo no superior a un 25% en los materiales que se emplean para fabricar envases y no superior a un 30% en los materiales que se emplean para fabricar tubos.

ESTABILIZANTES Y ADITIVOS

CARACTERISTICAS

Perlas, gránulos o, luego de ser transformado, láminas translúcidas o tubos de espesor variable. Es prácticamente insoluble en agua, etanol, metanol y hexano. Sin embargo el hexano disuelve los polímeros residuales de bajo peso molecular. Soluble en hidrocarburos aromáticos calientes. Se quema con una llama azul. La temperatura a la cual el material se ablanda varía con el contenido de acetato de vinilo; siendo aproximadamente de 100°C para materiales de bajo contenido y de aproximadamente 70°C para materiales cuyo contenido es de 30%.

IDENTIFICACION - [NOTA: si es necesario, cortar el material en trozos de tamaño apropiado].

Absorción infrarroja <460> del material a ensayar agregar 10 ml de tolueno y calentar a reflujo durante aproximadamente 15 minutos. Colocar unas gotas de la solución obtenida sobre una placa de cloruro de sodio y el solvente a 80°C. El espectro obtenido debe presentar los siguientes máximos de absorción que corresponden al acetato de vinilo: 1.740; 1.375; 1.240 ; 1.020 y 610 cm^-1 y máximos que corresponden al etileno en las posiciones siguientes: 2.920 a 2.850; 1.470; 1.460; 1.375; 730 y 720 cm^-1. El espectro obtenido debe ser, además, idéntico al obtenido con la sustancia de referencia. [NOTA: si el material a ensayar está en forma de láminas, el espectro puede determinarse directamente sobre un trozo de tamaño apropiado.]

ENSAYOS - [NOTA: si es necesario, cortar el material en trozos de tamaño apropiado.]

Solución indicadora - Disolver en alcohol 100 mg de azul de bromotimol, 20 mg de rojo de metilo y 200 mg de fenolftaleína. Diluir a 100 ml con el mismo solvente y filtrar.

Solución S₁ - Transferir 2,0 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 80 ml de tolueno y calentar a reflujo con agitación constante durante 90 minutos. Dejar enfriar a 60°C y agregar 120 ml de metanol con agitación constante. Filtrar la solución a través de un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media. Lavar el erlenmeyer y el filtro con 25 ml de una mezcla de 40 ml de tolueno y 60 ml de metanol, agregar el lavado al filtrado y diluir a 250 ml con la misma mezcla de solventes.

Solución S₂ - Transferir 25 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 500 ml de Agua para Inyectables y calentar a reflujo durante 5 horas. Dejar enfriar y decantar la solución. Reservar una porción de la solución para el ensayo Aspecto de la solución S₂ y filtrar el resto a través de un filtro de vidrio sinterizado. Emplear dentro de las 4 horas de su preparación.

Aspecto de la solución S₂ - Debe ser transparente e incolora.

Acidez o alcalinidad - A 100 ml de la Solución S₂ agregar 0,15 ml de Solución indicadora. No se deben requerir más de 1,0 ml de hidróxido de sodio 0,01 N para cambiar el color del indicador a azul. A 100 ml de Solución S₂ agregar 0,2 ml de naranja de metilo (SR). No se deben requerir más de 1,5 ml de ácido clorhídrico 0,01 N para iniciar el cambio de color del indicador de amarillo a anaranjado.

Absorbancia - A longitudes de onda entre 220 y 340 nm, la absorbancia de la Solución S₂ no debe ser mayor de 0,20.

Sustancias reductoras - A 20 ml de la Solución S₂ agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20 ml de permanganato de potasio 0,002 M. Calentar a reflujo durante 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes no debe ser mayor de 0,5 ml.

Fase estacionaria - Emplear dos placas para cromatografía en capa delgada (ver 100. Cromatografía) recubierta con gel de sílice para cromatografía con indicador de fluorescencia de 0,25 mm de espesor.

Fase móvil 1 - 2,2,4-Trimetilpentano y etanol (75:25).

Fase móvil 2 – Hexano

Fase móvil 3 — Cloruro de metileno y metanol (95:5).

Solución estándar A - Disolver 20 mg de ácido esteárico en 10 ml de cloruro de metileno.

Solución estándar B - Disolver 40 mg de oleamida en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 1 ml de esta solución a 5 ml con cloruro de metileno.

Solución estándar C - Disolver 40 mg de erucamida en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 1 ml de esta solución a 5 ml con cloruro de metileno.

Solución muestra - Evaporar a sequedad, aplicando vacío y a 45°C, 100 ml de la Solución S, Disolver el residuo en 2 ml de cloruro de metileno acidificado (SR).

Revelador - Acido fosfomolíbdico al 4% en etanol.

Procedimiento - Aplicar por separado sobre cada placa 10 µl de cada solución. Dejar secar las aplicaciones. Desarrollar la primera placa hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm empleando Fase móvil 1. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar. Pulverizar sobre la placa con Revelador y calentar a 120°C durante unos minutos para intensificar las manchas. Cualquier mancha que corresponda a ácido esteárico en el cromatograma de la Solución muestra no debe ser más intensa que la mancha principal en el cromatograma de la Solución estándar A.

Desarrollar la segunda placa hasta que el frente del solvente haya recorrido aproximadamente 13 cm empleando Fase móvil 2. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar . Desarrollar nuevamente hasta que él frente del solvente haya recorrido aproximadamente 10 cm emplendo Fase móvil 3. Retirar la placa de la cámara y dejarla secar. Pulverizar sobre la placa con Revelador. Calentar en una estufa a 120°C hasta que las manchas aparezcan. Cualquier mancha que corresponda a erucamida u oleamida en el cromatograma de la Solución muestra no debe ser más intensa que las manchas correspondientes en los cromatogramas de las Soluciones estándar B y C.

Sistema cromatográfico – Emplear un equipo para cromatografía de líquidos de un detector ultravioleta ajustado a 280 mm y una columna de 25 cm x 4,6 mm con fase estacionaria constituida por octadecilsilano químicamente unido a partículas de sílice porosa de 5 µm de diámetro. El caudal es de aproximadamente 1,5 ml por minuto.

Fase móvil - Emplear una de las dos mezclas siguientes:

Fase móvil 1 - Acetonitrilo, tetrahidrofurano y agua (60:30:10).

Fase móvil 2 - Metanol, 2-propanol y agua (50:45:5).

Solución estándar A - Disolver 25 mg de butilhidroxitolueno, 40 mg de 2,2’2",6,6’6"-hexater-butil-4,4',4"-[(2,4,6-trimetil-1,3,5-bencenotriil) trismetilen]trifenol, 40 mg de tetrakis [3- (3,5-di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato] de pentaeritritilo y 40 mg de 3-(3,5-diter-butil-4 -hidroxifenil) prioponato de octadecilo en 10 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50). Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución estándar B - Disolver 40 mg de 3 (3,5-diter-butil-4-hidroxifenil) propionato de oetadecilo y 40 mg de fosfito de tris (2,4-di-terbutilfenilo) en 10 ml de cloruro de metileno. Diluir 2 ml de esta solución a 50 ml con el mismo solvente.

Solución muestra A - Evaporar a sequedad, aplicando vacío y a 45 °C, 50 ml de Solución S₁. Disolver el residuo en 5 ml de una mezcla de acetonitrilo y tetrahidrofurano (50:50).

Solución muestra B —Evaporar a sequedad, aplicando vacío y a 45 °C, 50 ml de Solución S₁. Disolver el residuo en 5 ml de cloruro de metileno.

Aptitud del sistema - (ver 100. Cromatográfia)

Empleando Fase móvil 1 - Cromatografiar la Solución. estándar A, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: La eficiencia de la columma calculada para el pico de butilhidroxitolueno no debe ser menor de 2.500 platos teóricos y la resolución, R; entre los picos de tetrakis [3-(3,5-di-ter-butil-4= hidroxifenil) propionato] de pentaeritritilo y 2,2',2",6,6',6"-h-exa-terbutil-(4,4',4"-[(2,4,6, trimetil-1,3,5-bencenotriil) tris-metilen]trifenol no debe ser menor de 2,0.

Empleando Fase móvil 2 - Cromatografiar la Solución estándar B, registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos según se indica en Procedimiento: la resolución, R, entre los picos de (3,5 di-ter-butil-4-hidroxifenil)propionato de octadecilo y fosfito de tris(2,4-di-ter-butilfenilo) no debe ser menor de 2,0.

Procedimiento - Empleando Fase móvil 1, inyectar por separado en el cromatógrafo 20 ml de Solución muestra A y 20 ml de Solución estándar A. Registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos principales. El cromatograma de la Solución muestra A debe presentar únicamente los picos principales que corresponden a los picos en el cromatograma de la Solución estándar A con un tiempo de retención mayor de 2 minutos. Las respuestas de los picos en el cromatograma de la Solución muestra A no deben ser mayores que las de los picos correspondientes en el cromatograma de la Solución. estándar A, a excepción del último pico eluido en el cromatograma de la Solución estándar A.

Si el cromatograma de la Solución muestra A presenta un pico con el mismo tiempo de retención que el último antioxidante eluido con la Solución estándar A, emplear Fase móvil 2 y proceder según se indica a continuación:

Inyectar por separado en el cromatógrafo 20 ml de Solución muestra B y 20 ml de Solución estándar B. Registrar los cromatogramas y medir las respuestas de los picos principales. El cromatograma de la Solución muestra B debe presentar sólo picos principales que corresponden a los picos en el cromatograma de la Solución estándar B con un tiempo de retención mayor de 3 minutos.

Las respuestas de los picos en el cromatograma de la Solución muestra B no deben ser mayores que las de los picos correspondientes en el cromatograma de la Solución estándar B.

Sustancias solubles en hexano - Transferir 5 g del material a ensayar a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada. Agregar 50 ml de hexano y calentar a reflujo en un baño de agua con agitación constante durante 4 horas. Enfriar en un baño de hielo (se puede formar un gel). Adaptar una camisa de enfriamiento, llena de agua helada, a un filtro de vidrio sinterizado de porosidad media adaptado con un dispositivo que permita aplicar presión durante la filtración.

Dejar enfriar el filtro durante 15 minutos. Filtrar la solución de hexan aplicando una presión de 27 kPa sin lavar el residuo; el tiempo de filtración no debe exceder de 5 minutos. Evaporar 20 ml de la solución a sequedad. Secar a 100 °C durante 1 hora. El residuo no debe pesar más de 40 mg (2%) para copolímeros empleados en la fabricación de envases y no más de 0,1 g (5%) para copolímeros empleados para tubos.

Residuo de ignición <270> - No más de 1,2%, determinado sobre 5,0 g.

VALORACION

Transferir de 250 mg a 1 g del material a ensayar, según el contenido de acetato de vinilo del copolímero a ensayar, a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato de boca esmerilada de 300 ml. Agregar 40 ml de xileno. Calentar a reflujo con agitación durante 4 horas. Dejar enfriar, con agitación continua, hasta que comience la precipitación. Agregar lentamente 25,0 m1 de una solución de hidróxido de potasio alcohólico preparada disolviendo 6,6 g de hidróxido de potasio en 50 ml de agua y diluyendo a 1 litro con etanol. Calentar a reflujo con agitación durante 3 horas. Dejar enfriar con agitación continua, lavar el refrigerante con 50 ml de agua y agregar al erlenmeyer 30,0 ml de ácido sulfúrico 0,1 N. Transferir el contenido del erlenmeyer a un vaso de precipitados de 400 ml. Lavar el erlenmeyer con dos porciones de 50 ml de una solución de sulfato de sodio anhidro al 20% y tres porciones de 20 ml de agua. Agregar todos los lavados al vaso de precipitados que contiene la solución inicial. Titular el exceso de ácido sulfúrico con hidróxido de sodio 0,1 N, determinando el punto final potenciométricarnente (ver 780. Volunzetría). Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. Cada mililitro de ácido sulfúrico 0,1 N es, equivalente a 8,609, mg de acetato de vinilo.

Los envases plásticos para la recolección, almacenamiento, procesamiento y administración de sangre humana y hemoderivados se fabrican de uno o más polímeros y, si el caso así lo requiere, con aditivos permitidos. En condiciones normales de uso, los materiales no deben liberar monómeros u otras sustancias, en cantidades que puedan ser nocivas o causen modificaciones anormales a la sangre.

Los envases pueden contener soluciones anticoagulantes.

Cada envase está equipado con accesorios apropiados para facilitar su uso. El envase puede estar constituido por una unidad o estar conectado por uno o más tubos a uno o más envases complementarios para permitir la separación de los componentes sanguíneos en un sistema cerrado.

A menos que se especifique de otro modo en

Envases plásticos estériles para sangre humana y hemoderivados, los materiales de los envases deben cumplir con los requisitos para Poli (cloruro de vinilo) plastificado para envases destinados a soluciones acuosas para perfusión intravenosa.

CARACTERISTICAS

El envase debe ser suficientemente transparente para permitir un examen visual apropiado de su contenido antes y después de ser llenado con sangre y debe ser suficientemente flexible para ofrecer una mínima resistencia durante el llenado y vacíado bajo condiciones normales de uso. El envase no debe contener más de 5 ml de aire.

Solución S₁.- Llenar el envase con 100 ml de Solución fisiológica libre de piretógenos (SR) estéril. Cerrar el envase y calentarlo en autoclave, manteniendo la temperatura a 110 °C durante 30-minutos.

Si el envase a ensayar contiene una solución anticoagulante, vaciarlo previamente, y lavarlo con 250 ml de Agua para Inyectables a 20 ± 1 °C en varias porciones, descartando los lavados.

Solución S₂ - Introducir en el envase un volumen de Agua para Inyectables igual al volumen de solución de anticoagulante. Cerrar el envase y calentarlo en autoclave manteniendo la temperatura a 110 °C durante 30 minutos. Enfriar, agregar suficiente cantidad de Agua para Inyectables como para llenar el envase hasta su capacidad nominal.

Si el envase a ensayar contiene una solución anticoagulante, vaciarlo previamente y lavarlo según se indicó anteriormente para la Solución S₁.

Resistencia a variaciones de temperatura -Colocar el envase en una cámara apropiada la cual posee una temperatura inicial entre 20 y 23°C. Enfriarlo rápidamente a una temperatura de - 80 °C y mantenerlo a esa temperatura durante 24 horas. Elevar la temperatura a 50 °C y mantenerla durante 12 horas. Dejar enfriar a temperatura ambiente. El envase deberá cumplir con los ensayos para la Resistencia a la centrifugación, Resistencia al estiramiento, Fuga, Permeabilidad al vapor de agua, Vaciado bajo presión y velocidad de llenado, siguiendo las técnicas descriptas en este capítulo.

Solución indicadora - Disolver, con calentamiento suave, 50 mg de azul de bromofenol en 3,73 ml de hidróxido de sodio 0,02 M y diluir a 100 ml con agua. -

Procedimiento - Introducir en el envase un volumen de agua acidificada, por el agregado de 1 ml de solución de ácido clorhídrico diluido, en cantidad suficiente para alcanzar su capacidad nominal. Envolver el envase con un papel absorbente impregnado con Solución indicadora diluida 1 en 5. Secar y centrifugar durante 10 minutos a 5000 g. No se debe producir ninguna fuga, revelada por el papel indicador, ni ninguna distorsión permanente.

Resistencia al estiramiento - Introducir en el envase un volumen de agua acidificada por el agregado de 1 ml de solución de ácido clorhídrico diluido, en suficiente cantidad para alcanzar su capacidad nominal. Suspender el envase por el dispositivo de sujeción desde el extremo opuesto al tubo de salida, aplicar a lo largo del eje del tubo una fuerza de 20 N (2,05 kgf). Mantener la tracción durante 5 segundos. Repetir el ensayo aplicando la fuerza a cada una de las partes que se emplean para llenar y vaciar el envase. No deberá producirse rotura o deterioro apreciable.

Ensayo de fuga - Colocar el envase, que se ha sometido al ensayo de Resistencia al estiramiento, entre dos placas recubiertas con papel absorbente impregnado con Solución indicadora diluida 1 en 5, empleada en el ensayo de Resistencia a la centrifugación y secar. Aplicar, progresivamente, una fuerza a las placas de forma que la presión interna del envase alcance 67 kPa en el término de 1 minuto. Mantener la presión durante 10 minutos. No se debe percibir ninguna señal de fuga sobre el papel indicador.

Permeabilidad al vapor de agua - Para envases que contienen solución anticoagulante, llenar con un volumen de Solución fisiológica (SR), similar a la cantidad de sangre a contener.

Para el caso de los envases vacíos, llenar con la mezcla de solución de anticoagulante indicada y Solución fisiológica (SR). Cerrar el envase, pesarlo y almacenarlo a 5 ± 1 °C en una atmósfera con una humedad relativa de 50 ± 5 % durante 21 días. Al final de este período la pérdida de peso no deber ser mayor de 1 %.

Vaciado bajo presión - Llenar el envase con un volumen de agua a 5 ± 1 °C, equivalente a su capacidad nominal. Adosar a uno de los conectores, un equipo de transfusión sin cánula intravenosa. Comprimir el envase de manera tal que durante el vaciado se mantenga una presión interna de 40 kPa. El envase se debe vaciar en menos de 2 minutos.

Velocidad de llenado - Conectar el envase, por intermedio del tubo de transferencia con su correspondiente aguja a un depósito que contiene una cantidad apropiada de una solución con una viscosidad similar a la de la sangre, como por ej., una solución de sacarosa con una concentración de 335 g/1 a 37 °C - Mantener la presión interna del depósito a 9,3 kPa, estando al mismo nivel la base del mismo y la parte superior del envase. El volumen de líquido que fluye dentro del envase en 8 minutos no debe ser menor que la capacidad nominal del envase.

Transparencia -

Solución de sulfato de hidracina - Disolver 1,0 g de sulfato de hidracina en agua y diluir a 100 ml con el mismo solvente. Dejar reposar durante 4 a 6 horas.

Solución de hexametilentetramina - Transferir 2,5 g de hexametilentetramina a un matraz de 100 ml con tapón esmerilado. Agregar 25 ml de agua y disolver.

Suspensión opalescente primaria - Agregar a la Solución de hexametilentetramina contenida en el matraz, 25 ml de Solución de sulfato de hidracina. Mezclar y dejar reposar durante 24 horas. Esta suspensión es estable durante 2 meses cuando se la almacena en envases de una superficie interna perfectamente lisa. La suspensión no debe adherirse y debe agitarse cuidadosamente antes de ser empleada.

Procedimiento - Introducir al envase vacío un volumen, equivalente a su capacidad nominal, de la Suspensión opalescente primaria diluida de manera de obtener una absorbancia de 0,37 a 0,43 a 640 nm (el factor de dilución es de 1 en 16). La turbidez de la suspensión debe ser perceptible cuando se observa a través del envase, en comparación con un envase de similares características llenó de agua en las mismas condiciones.

Efectos hemolíticos en sistemas de pH regulado - (ver 470-Espectrofotometría ultravioleta y visible).

Solución reguladora madre - Disolver 90,og de cloruro de sodio, 34,6 g de fosfato dibásico de sodio y 2,43 g de fosfato monobásico de sodio en agua y diluir a 1 litro con el mismo solvente.

Solución reguladora Ao - A 30,0 ml de la, Solución reguladora madre agregar 10,0 ml de agua.

Solución reguladora BO - A 30,0 ml de la Solución reguladora madre agregar 20,0 ml de agua.

Solución reguladora Co - A 15,0 ml de la Solución reguladora madre agregar 85;0 ml de agua.

Solución A₁ - Mezclar 3,0 ml de Solución reguladora A_o y 12,0 ml de agua.

Solución B₁ - Mezclar 4,0 ml de Solución reguladora-B_O y 11,0 ml de agua.

Solución C₁ - Mezclar 4,75 ml de Solución reguladora C_o y 10,25 ml de agua.

Procedimiento - Transferir 1,4 ml de la Solución S₂ a cada uno de tres tubos de centrífuga. Al tubo I agregarle 0,1 ml de Solución reguladora A_o, al tubo II agregarle 0,1 ml de Solución reguladora B_o y al tubo III agregarle 0,1 ml de Solución reguladora C_o. Agregar a cada tubo 0,02 ml de sangre humana fresca heparinizada, mezclar bien y calentar en un baño de agua a 30 ± 1 °C durante 40 minutos. Emplear sangre recolectada 3 horas antes como máximo o sangre recolectada con solución anticoagulante de citrato-fosfato-dextrosa 24 horas antes como máximo.

A los tubos I, II y III agregar 1,5 ml de Solución A₁, Solución B₁ y Solución C₁, respectivamente. Al mismo tiempo y de la misma manera, preparar otros tres tubos, reemplazando Solución S₂ por agua, estos tubos servirán como control. Centrifugar simultáneamente los tubos a ensayar y los de control a exactamente 2500 g en la misma centrífuga horizontal durante 5 minutos. Determinar las absorbancias, con un espectrofotómetro apropiado, en celdas de 1 cm, a la longitud de onda de 540 nm, empleando la Solución reguladora madre como blanco. Calcular el porcentaje de hemólisis por la fórmula siguiente:

en la cuál A₁₀₀, es la absorbancia del tubo III y A_exp son las absorbancias de los tubo I ó II, o las correspondientes a los tubos controles.

La solución en el tubo I debe dar un porcentaje de hemólisis no mayor a 10% y el porcentaje de hemólisis de la solución en el tubo II no debe diferir en más de 10% al del tubo control correspondiente.

Esterilidad <370> - Introducir asépticamente en el envase 100 ml de Solución fisiológica (SR) estéril y agitar el envase para asegurar que la superficie interna se moje completamente. Filtrar el contenido del envase a través de un filtro de membrana y colocar la membrana en un medio de cultivo apropiado. Los envases deben cumplir con el ensayo de esterilidad.

Piretógenos <340> - Inyectar 10 ml de la Solución S₁ por cada kg de peso del conejo. La Solución S₁ debe cumplir con los requisitos establecidos.

Toxicidad anormal <360> - Inyectar 0,5 ml de la Solución S, a cada ratón. La Solución S₁ debe cumplir con los requisitos establecidos.

Acondicionamiento -

Los envases están contenidos en sobres protectores. Al separarse el envase de su sobre protector, el mismo no debe evidenciar fugas ni crecimiento de microorganismos. El sobre protector debe ser suficientemente resistente para soportar la manipulación normal.

El sobre protector debe estar sellado de tal manera que no pueda abrirse y cerrarse nuevamente sin evidenciar la rotura del mismo.

Rotulado - Debe cumplir con las normas vigentes.

ENSAYOS

Deberán cumplir con los ensayos para Envases plásticos estériles para sangre humana o hemoderivados y con los siguientes ensayos para detectar materia extraíble.

Solución de referencia Transferir Agua para Inyectables a un erlenmeyer de vidrio al borosilicato y calentar en autoclave a 110 °C durante 30 minutos.

Sustancias reductoras - Inmediatamente después de la preparación de la Solución- S₂, transferir al erlenmeyer al borosilicato una cantidad correspondiente al 8% de la capacidad nominal del envase. Simultáneamente preparar un blanco empleando un volumen igual de la Solución de referencia recientemente preparada en otro erlenmeyer de vidrio al borosilicato. A cada solución agregar 20,0 ml de permanganato de potasio 0,002 M y 1 ml de ácido sulfúrico diluido. Dejar reposar durante 15 minutos protegido de la luz.

A cada solución agregar 0,1 g de ioduro de potasio. Dejar reposar durante 5 minutos protegido de la luz y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. La diferencia entre las dos titulaciones no debe ser mayor de 2,0 ml.

Acidez o alcalinidad - A un volumen de Solución S₂, equivalente al 4 % de la capacidad nominal del envase, agregarle 0,1 ml de fenoftaleína (SR). La solución permanece incolora. Agregar 0,4 ml de una solución de hidróxido de sodio 0,01 M. La solución toma color rosado. Agregar 0,8 ml de ácido clorhídrico 0,01 M y 0,1 ml de rojo de metilo (SR 1). La solución se torna de color anaranjado rojizo o rojo.

Solución de cloruro de sodio - Disolver en agua una cantidad de cloruro de sodio, equivalente a 0,824 g de CINa, y diluir a 1 litro con el mismo solvente. Diluir 1 ml de esta solución a 100 con agua inmediatamente antes de usar (5 ppm de CI).

Procedimiento - A 15 ml de Solución S₂ agregar 1 ml de ácido nítrico diluido y volcar la mezcla de una sola vez en un tubo de Nessler que contenga 1 ml de nitrato de plata (SR). Luego de dejar en reposo esta solución durante 5 minutos protegido de la luz, no debe presentar una turbidez mayor que la de una solución preparada simultáneamente, mezclando 1,2 ml de Solución de cloruro de sodio con 13,8 ml de agua. (0,4 ppm).

Solución alcalina de tetraiodoniercurato de potasio - Disolver 11 g de ioduro de potasio y 15 g de ioduro de mercurio(II) en agua y diluir a 100 ml con el mismo solvente. Mezclar extemporáneamente 1 volumen de esta solución y 1 volumen de solución de hidróxido de sodio de 250 gl.

Solución de amonio - Disolver en agua una cantidad de cloruro de amonio, equivalente a 741 mg de NH₄cl, y diluir a 1 litro con el mismo solvente. Diluir 1 ml de esta solución a 100 con agua. Tomar 2 volúmenes de la solución anterior y diluir a 5 volúmenes con agua inmediatamente antes de usar. (1 ppm de NH₄).

Solución diluida de hidróxido de sodio - Disolver 8,5 g de hidróxido de sodio en agua y diluir a 100 ml con agua.

Procedimiento - Diluir 5 ml de Solución S₂ a 14 ml con agua, alcalinizar si es necesario con Solución diluida de hidróxido de sodio y diluir a 15 ml con agua. Agregar 0,3 ml de Solución alcalina de tetraiodomercurato de potasio. Después de 5 minutos, el color amarillo no debe ser más intenso que el producido por una solución obtenida mezclando 10 ml de Solución de amonio con 5 ml de agua y 0,3 ml de Solución alcalina de tetraiodomercurato de potasio. (2 ppm).

Residuo por evaporación - Evaporar a sequedad 100 ml de Solución S₂ en un vaso de precipitados de vidrio al borosilicato, previamente calentada a 105 °C. Evaporar a sequedad, en las mismas condiciones 100 ml de la Solución de referencia. Secar hasta peso constante entre 100 y 105 °C. El residuo de la Solución S₂ no debe pesar más de 3 mg, comparado con la Solución de referencia.

Absorbancia - Determinar la absorbancia de la Solución a longitudes de onda entre 230 a 360 nm, empleando la Solución de referencia a como blanco. A longitudes de onda entre 230 y 250 nm, la absorbancia no debe ser mayor de 0,30. A longitudes de onda entre 251 y 360 mn, la absorbancia no debe ser mayor de 0,10.

Solvente de extracción - Emplear alcohol diluido con agua con una densidad relativa entre 0,9389 y 0,9395 (ver 160. Determinación de la densidad relativa).

Solución madre del estándar - Disolver 100 mg de ftalato de bis(2-etilhexilo) en Solvente de extracción y diluir a 100,0 ml con el mismo solvente.

Soluciones estándar - Transferir 20,0; 10,0; 5,0; 2,0 y 1,0 ml de Solución madre del estándar a sendos matraces aforados de 100 ml y diluir a volumen con Solvente de extracción para obtener las Soluciones estándar A, B, C, D y E, respectivamente.

Determinar las absorbancias; con un espectrofotómetro apropiado, de las Soluciones estándar a la longitud de 272 nm, empleando Solvente de extracción como blanco. Trazar una recta de absorbancia en función de la concentración de ftalato de bis(2-etilhexilo).

Procedimiento de extracción - Mediante el empleo del adaptador correspondiente, llenar el envase vacío con un volumen de Solvente de extracción previamente calentado a 37 °C, igual a la mitad del volumen nominal. Expulsar el aire completamente del envase y sellar el tubo de salida. Sumergir el envase lleno en posición horizontal en un baño de agua a 37 ± 1 °C durante 60 ± 1 minuto sin agitar. Retirar el envase del baño de agua, invertirlo suavemente 10 veces y transferir el contenido a un matraz. Inmediatamente medir la absorbancia a 272 nm, empleando Solvente de extracción como blanco.

Determinar la concentración de ftalato de bis(2-etilhexilo), en mg por cada 100 ml de extracto, a partir de la recta de calibración.

La concentración no debe exceder:

- 10 mg por cada 100 ml para envases cuyo volumen nominal sea mayor o igual de 300 ml, pero menor de 500 ml;

- 13 mg por cada 100 ml para envases cuyo volumen nominal sea mayor de 150 ml, pero menor de 300 ml;

- 14 mg por cada 100 ml para envases cuyo volumen nominal sea menor o igual 150 ml.

Acondicionamiento y rotulado - Ver Envases plásticos estériles para sangre humana o hemoderivados.

Los envases plásticos estériles de poli(cloruro de vinilo) para sangre humana que contienen una solución anticoagulante o soluciones conservadoras deberán cumplir con las monografías correspondientes. Estos envases se emplean para la recolección, almacenamiento y administración de sangre. Antes de ser llenados deberán cumplir con la descripción y características dadas en Envases plásticos vacíos estériles de poli(cloruro de vinilo) plastificado para sangre humana o hemoderivados.

A menos que se especifique de otro modo en Envases plásticos estériles para sangre humana o hemoderivados, la naturaleza y composición de los materiales de los envases deben cumplir con los requisitos para Poli(cloruro de vinilo) plastificado para envases destinados a sangre humana o hemoderivados y para envases destinados a soluciones acuosas para perfusión intravenosa.

ENSAYOS

Los envases deben cumplir con los ensayos para Envases plásticos estériles para sangre humana o hemoderivados y con los siguientes ensayos para medir el volumen de solución anticoagulante y para detectar materia extraíble.

Volumen de solución anticoagulante -Transferir completamente el contenido del envase a una probeta. El volumen no debe diferir en más de ± 10 % del volumen declarado.

Absorbancia - Determinar la absorbancia de la solución anticoagulante, extraída del envase, entre 250 y 350 nm, empleando como blanco una solución anticoagulante de la misma composición que no ha estado en contacto con el material plástico. La absorbancia, a la longitud de 280 nm, no debe ser mayor de 0,5.

Ftalato de bis(2-etilhexilo) extraíble - Retirar cuidadosamente la solución anticoagulante por medio del tubo de transferencia empleando un embudo adaptado a dicho tubo, llenar completamente el envase con agua, dejar en contacto durante 1 minuto, y presionar suavemente el envase. Después vaciarlo completamente y repetir el lavado. El envase vacío y lavado debe cumplir con el ensayo Ftalato de bis(2-etilhexilo) extraíble descripto en Envases plásticos vacíos estériles de poli(cloruro de vinilo) para sangre humana o hemoderivados.

Acondicionamiento y rotulado - Ver E Ver Envases plásticos estériles para sangre humana o hemoderivados.

Los envases plásticos destinados a soluciones acuosas para perfusión intravenosa deben cumplir con los siguientes ensayos.

ENSAYOS

Solución S - Llenar un envase hasta su capacidad nominal con agua y taparlo. Colocar el envase en un autoclave a una temperatura de 121°C, durante 30 minutos. Si el calentamiento a 121 °C produce el deterioro del envase, calentar a 100 °C durante 2 horas. Emplear la solución, dentro de las 4 horas de preparada.

Blanco - Preparar un blanco calentando agua en un erlenmeyer de vidrio al borosilicato tapado, a la temperatura y por el tiempo empleado para la preparación de la Solución S.

Aspecto de la solución S - Debe ser transparente e incolora.

Acidez o alcalinidad - A un volumen de Solución S correspondiente al 4 % de la capacidad nominal del envase agregar 0,1 ml de fenolftaleína (SR). La solución debe ser incolora. Agregar 0,4 ml de hidróxido de sodio 0,01 M. La solución debe tomar una coloración rosa. Agregar 0,8 ml de ácido clorhídrico 0,01 M y 0,1 ml de rojo de metilo (SR 1). La solución debe ser de color anaranjado rojizo o rojo.

Absorbancia - Determinar la absorbancia de la Solución S entre 230 y 360 nm, no debe ser mayor de 0,20.

Sustancias reductoras - A 20,0 ml de Solución S agregar 1 ml de ácido sulfúrico diluido y 20,0 ml de solución de permanganato de potasio 0,002M. Calentar a ebullición durante 3 minutos y enfriar inmediatamente. Agregar 1 g de ioduro de potasio y titular inmediatamente con tiosulfato de sodio 0,01 N, empleando 0,25 ml de almidón (SR) como indicador. Realizar una determinación con un blanco y hacer las correcciones necesarias. La diferencia entre los volúmenes de titulación no debe ser mayor de 1,5ml.

Solución de sulfato de hidracina - Disolver 1,0 g de sulfato de hidracina en agua y diluir a 100 ml con el mismo solvente. Dejar reposar durante 4 a 6 horas.

Solución de hexametilentetramina - Transferir 2,5 g de hexanetilentetramina a un matraz de 100 ml con tapón esmerilado. Agregar 25 ml de agua y disolver.

Suspensión opalescente primaria - Agregar a la Solución de hexametilentetramina contenida en el matraz, 25 ml de Solución de sulfato de hidracina. Mezclar y dejar reposar durante 24 horas. Esta suspensión es estable durante 2 meses cuando se la almacena en envases de vidrio de superficies internas lisas. La suspensión no debe adherirse y debe mezclarse cuidadosamente antes de ser empleada.

Procedimiento - Llenar el envase empleado anteriormente para la preparación de la Solución S, con un volumen de Suspensión opalescente primaria, igual a la capacidad nominal del envase, diluida 1 en 200 para un envase de polietileno o polipropileno y 1 en 400 para otros tipos de envases. La opalescencia de la suspensión debe ser perceptible cuando se observa a través del envase, en comparación con un envase de similares características lleno en las mismas condiciones pero con agua.

Acondicionamiento - El envase deberá ser acondicionado en un sobre protector.

Rotulado - Debe cumplir con las normas vigentes.